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人氣管上皮細(xì)胞的特性和使用建議
人氣管上皮細(xì)胞(HTEC)提取于人肺組織，原代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×105cells/ml，此細(xì)胞通過(guò)Cytokeratin-18, -19和Vimentin抗體熒光免疫方法驗(yàn)證，經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
人氣管上皮細(xì)胞特性:
1) 細(xì)胞來(lái)源于人正常氣管組織。
2) 細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3) 不含有 -1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
4) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90%。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
人氣管上皮細(xì)胞產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
人氣管上皮細(xì)胞使用建議：
1、可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中,備用;細(xì)胞*傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
2、確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將部分細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于后續(xù)和技術(shù)支持溝通交流。