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脂肪檢測(cè)—索式提取器提取法詳解

閱讀:2253        發(fā)布時(shí)間:2021-8-4

脂肪檢測(cè)方法可用索式提取法(經(jīng)典方法)

原理

樣品經(jīng)前處理后,放入圓筒濾紙內(nèi),將濾紙筒置于索式提取管中,利用YM或石油醚在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)。

采用這種方法測(cè)出游離態(tài)脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì),所以用索氏提取法測(cè)得的脂肪為粗脂肪。

適用范圍與特點(diǎn)

索氏提取法適用于脂類含量較高,結(jié)合態(tài)的脂類含量較少,能烘干磨細(xì),不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測(cè)定。此法只能測(cè)定游離態(tài)脂肪,而結(jié)合態(tài)脂肪無(wú)法測(cè)出,要想測(cè)出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測(cè)出。

另外此法是經(jīng)典方法,對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠,但需要周期長(zhǎng),溶劑量大。

濾紙筒的制備

將濾紙剪成長(zhǎng)方形8×375px ,卷成圓筒,直徑為150px,將圓筒底部封好,最好放一些脫脂棉,避免向外漏樣。

稱取樣品

將樣品烘干磨細(xì),稱取一定量與紙筒封好上口,最好用測(cè)定水的樣品。

索式提取器的準(zhǔn)備

索氏提取器由三部分組成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。

抽提

將裝好樣的紙筒放入抽提管 , 倒入YM,YM的量從提取管加入,加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,在恒溫水浴中抽提,水浴溫度大約為55℃左右,可用濾紙檢驗(yàn),理論值抽提6-8小時(shí),實(shí)際值3-4小時(shí),但也根據(jù)樣品性質(zhì)來(lái)決定。

回收YM

當(dāng)YM在提取管內(nèi)即將虹吸時(shí)立即取下提取管,將其下口放到Y(jié)M回收瓶?jī)?nèi),使之傾斜,然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。

計(jì)算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和樣品重(g)

W1——瓶子重量(g)

W——樣品重量(g)

或:脂肪%=(抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量)/樣品重量 × 100

濾紙筒應(yīng)事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。

索式提取法注意事項(xiàng)

(1)樣品應(yīng)干燥后研細(xì),裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,否則重做。

(2)放入濾紙筒的高度不能超過(guò)回流彎管,否則YM不易穿透樣品,使脂肪不能全部提出,造成誤差。

(3) 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理,等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi)。

(4) 提取時(shí)水浴溫度不能過(guò)高,一般使YM剛開始沸騰即可(約45℃左右),回流速度以8-12次/時(shí)為宜。

(5) 所用YM必需是無(wú)水YM,如含有水分則可能將樣品中的糖以及無(wú)機(jī)物抽出,造成誤差。

(6) 若用干樣品測(cè)定脂肪,可按下式計(jì)算原來(lái)樣品脂肪的含量

脂肪(%)= (W1-W2)(100-A) / W

A— 100克樣品中水分的含量(g)

(7) 冷凝管上端最好連接一個(gè)氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入,而且還可以避免YM揮發(fā)在空氣中。這樣可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染,如無(wú)此裝置,塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可。

(8)如果沒(méi)有無(wú)水YM可以自己制備,制備方法如下:在100mlYM中,加入無(wú)水石膏50克,振搖數(shù)次,靜止10小時(shí)以上,蒸餾,收集35℃以下的蒸餾液,即可應(yīng)用。

(9)將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時(shí),瓶口向一側(cè)傾斜45度防止揮發(fā)物YM易與空氣形成對(duì)流,這樣干燥迅速。

(10)如果沒(méi)有YM或無(wú)水乙醇時(shí),可以用石油醚提取,石油醚沸點(diǎn)30-60℃為好。

(11)使用揮發(fā)YM或石油醚時(shí),切忌直接用火源加熱,應(yīng)用電熱套、電水浴、電燈泡等。

(12) 這里恒重的概念有區(qū)別,它表示最初達(dá)到的重量,即溶劑和水分*揮發(fā)時(shí)的恒重,此后若在繼續(xù)加熱,則因油脂氧化等原因會(huì)導(dǎo)致重量增加。

(13) 在干燥器中的冷卻時(shí)間一般要一致。


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