1、細胞密度對電轉的影響
細胞系電轉的細胞密度最好在0.5M-2.0M/20ul，或2.5M-10M/100ul. 常用1M/20ul. PBMC直徑更小，細胞密度一般為1M-5M/20ul, 或5M-25M/100ul。細胞密度越高可以增加細胞間電流輔助，從而增加細胞的有效電轉面積。密度高時電壓需要稍微調高一些，所以電轉時細胞密度根據(jù)實驗需要選定后盡量不要變化。
需要特別注意的地方：一個樣品加進電擊管后，不要等候，馬上進行電轉，完成后再處理下一個樣品，不要把一批樣品全部加樣完成后再一起電轉。等候時間過長，細胞沉降也會導致電擊管內上下細胞密度不均勻而降低電轉效率。電轉完成后細胞可以馬上取出培養(yǎng)，也可以等全部樣品處理完畢再取出培養(yǎng)。
2、細胞聚團對電轉的影響
當細胞聚團時，其中只有一側細胞可以被電轉，中間和另一側細胞不能被電轉，降低電轉效率。所以消化細胞過程中注意細胞不要成團。
3、溫度對電轉的影響
溫度對電轉影響也很大。一般室溫（23度）適宜進行電轉實驗。溫度越低，需要電壓越高。4度電轉比室溫23度電轉大概需要增加3%到5%的電壓。所以為保證電轉實驗結果可重復性，需要將每次的電轉溫度保持一致。
4、DNA質量對電轉的影響
DNA越純凈，越有利于電轉。DNA中雜質較多時，細胞毒性大，非常不利于電轉。市場上在售的品牌質粒提取試劑盒一般都可以。DNA加得比較多時，電轉效率呈線性遞增。但是電轉時DNA加的過高也會產(chǎn)生細胞毒性，電壓需要稍微下調。所以DNA濃度應根據(jù)實驗需要相應調整，濃度范圍一般在10ug/ml-200ug/ml。
