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東莞市百順生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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NIBSC 09/138定量 BCR-ABL1 mRNA使用方法

時(shí)間:2024/7/22閱讀:384
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NIBSC 09/138 定量 BCR-ABL1 mRNA國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱:Genetic Reference Panel, for the quantitation of BCR-ABL translocation by RQ-PCR (1st I.S.)

品牌:WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品NIBSC

貯存

將所有未開(kāi)封的NIBSC 09/138 定量 BCR-ABL1 mRNA安瓿瓶存放在 -20°C 或以下。請(qǐng)注意:由于凍干材料固有的穩(wěn)定性,NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。


 開(kāi)瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個(gè)“易開(kāi)"顏色的壓力點(diǎn),窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機(jī)可商購(gòu)獲得。要打開(kāi)安瓿,輕輕敲擊安瓿以收集底部(標(biāo)記)端的材料,并按照安瓿破碎器隨附的制造商說(shuō)明進(jìn)行操作。


材料的使用

NIBSC 09/138 定量 BCR-ABL1 mRNA在重新配制之前,不應(yīng)嘗試稱量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠帧?/p>

在繼續(xù)之前,請(qǐng)閱讀第 3-5 頁(yè)上的建議測(cè)定和二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)方法。如果您要校準(zhǔn)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn),請(qǐng)?jiān)谂c一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)提取 RNA、制備 cDNA 和測(cè)試該 cDNA。這將使您能夠確定二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的 IS 值。

a。如上文第 6 節(jié)所述打開(kāi)安瓿瓶。

b。在室溫下使用 1ml Trizol、600 µl RLTbuffer 或其他 RNA 提取系統(tǒng)的等價(jià)物重構(gòu)每種凍干材料。

C。確保用移液器吸頭或針頭反復(fù)抽吸來(lái)裂解所有細(xì)胞。孵育 5 分鐘。

d。將每個(gè)安瓿的全部?jī)?nèi)容物轉(zhuǎn)移到無(wú)核酸酶管中。

e.使用常用方法從 4 種材料中的每一種中提取 RNA。

F。使用常用方法為 4 種 RNA 材料中的每一種制備 cDNA。 (如果按照建議的方法,從每種 RNA 材料中制備 2 批 cDNA;見(jiàn)第 3 頁(yè))。

G。使用常用方法確定 cDNA 材料的 % BCR-ABL1 / 對(duì)照基因值。

H。 通過(guò)分析這些材料的觀察值與預(yù)期值,確定用于報(bào)告 IS 的 BCR-ABL1 測(cè)定的校正因子。


我司專業(yè)提供NIBSC 09/138 定量 BCR-ABL1 mRNA標(biāo)準(zhǔn)品,歡迎咨詢定購(gòu)。

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