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臍帶間充質(zhì)干細胞復蘇流程

閱讀:462      發(fā)布時間:2024-12-18
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  臍帶間充質(zhì)干細胞(UCMSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細胞,具有廣泛的應用前景。臍帶間充質(zhì)干細胞可以在進行UCMSCs的復蘇過程中,需要注意以下幾個主要步驟:
 
  臍帶間充質(zhì)干細胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細胞,具有廣泛的應用前景。這些干細胞具有較強的自我更新能力和多向分化潛能,能夠分化為多種細胞類型,如骨細胞、肌肉細胞、神經(jīng)細胞等。
 
  臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶間充質(zhì)干細胞的原代培養(yǎng)及多次傳代,同時還能保持其多向分化的潛能,如分化為骨細胞、軟骨細胞等,使用時無需添加血清或血清替代物。
 
  以下是使用臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基進行臍帶間充質(zhì)干細胞復蘇的流程:
 
  (1)將臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基平衡至室溫,每個培養(yǎng)瓶加入15ml 的臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基。
 
  (2)取出凍存的細胞,置入37℃水浴鍋中快速解凍。
 
  (3)立即吸取解凍后的細胞懸液轉(zhuǎn)移1ml至15ml離心管中,逐滴加入4ml臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基,混勻后計數(shù)。
 
  (4)根據(jù)計數(shù)結(jié)果,按照合適的接種密度(推薦8000cells/cm2)。將細胞接種到已加入15ml 臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)容器中。
 
  注:若細胞凍存液中不含DMSO,可將細胞直接加入20ml臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基中,且第二天無需換液。
 
  (5)將細胞放在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
  (6)12h~24h后,待細胞正常貼壁,棄去培養(yǎng)上清,加入新鮮的、已平衡至室溫的20ml臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基。根據(jù)細胞生長情況,每3天換液至細胞融合度達到80%~90%。
 
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