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PRIME-P100-1G-PEI線性轉(zhuǎn)染試劑
  • PRIME-P100-1G-PEI線性轉(zhuǎn)染試劑
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貨物所在地:天津天津市

地: 美國

更新時間:2024-12-12 13:43:45

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PEI線性轉(zhuǎn)染試劑 PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。

產(chǎn)品簡介:
PEI線性轉(zhuǎn)染試劑以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethyleniminePEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進(jìn)入細(xì)胞。
應(yīng)用范圍:能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系,包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。
產(chǎn)品優(yōu)勢:低毒,高效;操作簡單,高性價比;具有可重復(fù)性的轉(zhuǎn)染結(jié)果;適用于快速、高通量轉(zhuǎn)染流程
轉(zhuǎn)染步驟:

-HEK293貼壁細(xì)胞為例,步驟如下:

1. 細(xì)胞接種:細(xì)胞密度2-6 x106 cells/mL.

2. 質(zhì)粒的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每10 6個細(xì)胞稀釋1.0 ug pDNA。

3. PEI的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每10 6個細(xì)胞稀釋3.0 ug PEI Prime,混勻

4. 通過快速,短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管,將pDNAPEI Prime溶液混合在一起。

5. 使pDNAPEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

6. 一邊旋轉(zhuǎn)板,一邊將pDNAPEI混合物逐漸滴加到細(xì)胞中。

7. 37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

轉(zhuǎn)染的優(yōu)化:

為達(dá)到高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性的良好結(jié)果,可以進(jìn)行如下優(yōu)化:

參數(shù)范圍
PEI濃度3.50-6.50mg/L final culture
DNA濃度0.75-1.5mg/L final culture
PEI/DNA混勻時間5.0-15.0minutes




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