產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)ELISA試劑盒

英文名稱：Human fibroblast growth factor 23 ELISA KIT

規(guī)格：96T/盒：可以檢測(cè)90個(gè)樣本；48T/盒：可以檢測(cè)42個(gè)樣本

品牌：軒澤康

英文縮寫：FGF23

種屬：人ELISA試劑盒

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

所需樣本體積：50-100ul

適用范圍：僅供科研

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本。（包括尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本）

軒澤康供應(yīng)的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等等

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)ELISA試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法：

可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

操作注意事項(xiàng)：

1、在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆；

2、當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡；

3、洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性；

4、一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣；

5、如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)；

6、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔；

7、不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑；

8、底物請(qǐng)避光保存。