【中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(MANF)簡(jiǎn)介】：是一種蛋白質(zhì)，是由MANF管家基因編碼的。它是一種高度保守的蛋白質(zhì)，其功能是已知的。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（MANF）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（MANF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

人（MANF）酶聯(lián)免疫試劑盒 ELISA檢測(cè)性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：

1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

人（MANF）酶聯(lián)免疫試劑盒 ELISA檢測(cè)組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)參考說明書）

注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。 

實(shí)驗(yàn)需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱） 

2、精密移液器、吸頭、加樣槽 

3、蒸餾水或去離子水 

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 

5、37℃水浴鍋或恒溫箱 

6、EP 管 

7、無粉一次性乳膠手

操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實(shí)驗(yàn)過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測(cè)定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

【說明】：電子版說明書僅供參考，實(shí)際操作請(qǐng)按照隨產(chǎn)品發(fā)送的印刷版說明書。中英文說明書可能會(huì)有不一致的地方請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。

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XZK-4571    人血管緊張素??(ANG ??)檢測(cè)試劑盒         靈敏度＜1.0 pg/mL

XZK-2300    人促紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒         靈敏度＜0.1 mIU/ml

XZK-2626    人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測(cè)試劑盒      靈敏度＜0.1 ng/mL

XZK-2074    人骨成型蛋白2(BMP-2)檢測(cè)試劑盒         靈敏度＜1.0 pg/mL

XZK-3240    人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒    靈敏度＜0.1 ng/Ml

XZK-4783    人胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測(cè)試劑盒   靈敏度＜1.0 ng/mL

XZK-2421    人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)檢測(cè)試劑盒   靈敏度＜1.0 ng/mL

XZK-3753    人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)檢測(cè)試劑盒         靈敏度＜1.0 pg/mL

XZK-1079    人白細(xì)胞介素18(IL-18)檢測(cè)試劑盒         靈敏度＜于1.0 pg/mL

XZK-2683    人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)檢測(cè)試劑盒   靈敏度＜1.0 pg/mL

XZK-3158    人(IgA)檢測(cè)試劑盒            靈敏度＜1.0μg/mL

XZK-3174    人(IgM)檢測(cè)試劑盒           靈敏度＜10μg/mL

XZK-749     人S100B蛋白(S-100B)檢測(cè)試劑盒          靈敏度＜1.0 ng/mL

XZK-5175    人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)檢測(cè)試劑盒   靈敏度＜50 pg/mL