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目錄:廈門逸漠生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>人源細(xì)胞系>> LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)
  • LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)
  • LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)
參考價(jià) 1500
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
1500
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 IMMOCELL
  • 型號
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 廈門市
屬性

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更新時(shí)間:2024-02-26 16:35:35瀏覽次數(shù):244評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×106cells/T25或1mL凍存管
貨號 IM-H072
LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確),引進(jìn)ATCC細(xì)胞庫,確保細(xì)胞準(zhǔn)確,提供STR鑒定報(bào)告,出庫附COA質(zhì)檢報(bào)告,確保無支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等,LNCaP細(xì)胞代數(shù)5代以內(nèi),現(xiàn)貨供應(yīng),技術(shù)人員全程一對一指導(dǎo),售后無憂,與多家科研機(jī)構(gòu)高校合作

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)

產(chǎn)品基本信息

細(xì)胞名稱:LNCaP人前列腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)

種屬來源:人

組織來源:前列腺

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

生長特性:貼壁生長

培養(yǎng)基: RPMI-1640+ FBS 10%+p/s 1%

生長條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代方法:1:2,每周 2-3次

凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

支原體檢測:無

注意事項(xiàng):

1. 該細(xì)胞長得較慢,復(fù)蘇和傳代后需24-48小時(shí)貼壁。該細(xì)胞貼壁不牢,僅僅輕輕地吸附在皿底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸,應(yīng)及時(shí)換液。生長較慢,傳代后48小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)。

2. 細(xì)胞封包、寄出時(shí),罐裝運(yùn)輸后通常多數(shù)細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。收到后,靜置6-8h以使細(xì)胞再貼壁,此后換上新鮮培養(yǎng)液。如仍有細(xì)胞漂浮,需將培養(yǎng)瓶上清及貼壁細(xì)胞收集,1000rpm離心5分鐘,用新鮮培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個(gè)6cm培養(yǎng)皿或T25培養(yǎng)瓶中。

細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、收集細(xì)胞培養(yǎng)上清:抽出瓶中的培養(yǎng)基和懸浮的細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清,細(xì)胞重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。

b、剩下貼壁的細(xì)胞,用不含鈣、鎂離子的PBS輕輕潤洗(注意不要將細(xì)胞吹下)細(xì)胞1次。

c、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

d、按3mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻吹下細(xì)胞后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

e、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心5 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9. 注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。


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