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Sigma脫氧核糖核酸酶是一種內(nèi)切核酸酶，可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產(chǎn)生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。我們的DNase I可將雙鏈和單鏈DNA酶解成寡核苷酸和單核苷酸。

Sigma脫氧核糖核酸酶

一般描述

Sigma脫氧核糖核酸酶是一種從牛胰腺分離的核酸內(nèi)切酶。

我們的DNase I可將雙鏈和單鏈DNA酶解成寡核苷酸和單核苷酸。
牛胰腺DNase存在四種異構酶A, B, C和D，均具有不同的等電點：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式為A，其次為B和C，D所占的比例最小。
DNase I結構類似于核酸外切酶III。其中包括兩個中央β折疊。每個β折疊由六個β-鏈組成。這種復雜的β折疊被大量環(huán)形和螺旋形區(qū)域包圍。該酶結構類似于核酸外切酶III。^[1]

應用

從原代細胞分離液中去除DNA，在降低粘度的同時提高產(chǎn)量：
將標記堿基摻入DNA：DNA缺口
放射性標記
生物工藝應用：DNA去除
在RT-PCR前從RNA制劑中去除基因組DNA
體外轉錄
缺口平移
DNase足跡
肌動蛋白調(diào)控胞內(nèi)肌動蛋白聚合和細胞凋亡
蛋白質(zhì)與核酸紫外線交聯(lián)
DNase參與調(diào)控胞內(nèi)肌動蛋白聚合，同時參與細胞凋亡過程 ^[1]

用于從蛋白質(zhì)樣品中除去 DNA。

生化/生理作用

Sigma脫氧核糖核酸酶是一種內(nèi)切核酸酶，可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產(chǎn)生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。當Mg²⁺存在時，DNAse I可獨立切割DNA的每條鏈且切割位點是隨機的。當Mn²⁺存在時，兩條DNA鏈都幾乎是在同樣的位置被切割。二價陽離子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活劑。5 mM濃度的Ca²⁺可穩(wěn)定酶免收蛋白水解酶的消化。最適pH在7-8之間。來自牛胰腺的DNAse I由四種色譜可區(qū)分的組分A，B，C和D組成，它們的摩爾比分別為4:1:1。僅發(fā)現(xiàn)少量D。螯合劑、十二烷基硫酸鈉（SDS）和肌動蛋白都已知可抑制酶的活性。

特點和優(yōu)勢

我們的脫氧核糖核酸酶DNAse I基本屬于不含RNAse產(chǎn)品，支持該產(chǎn)品應用。

單位定義

一Kunitz單位的酶在以I型或III型DNA作為底物時，在 pH 5.0，37°C的條件下在每mL中每分鐘可引起0.001的A₂₆₀改變。

外形

粗制品，含有氯化鈣

制備說明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分裝保存在?20 °C一周后可能會丟失<10%的活性。同樣的溶液保存在2-8 °C則可能丟失約20%的活性。當在pH 5和7之間時，它可在60 °C維持活性最長達五小時，并在68 °C <10分鐘內(nèi)丟失活性。它在乙酸緩沖液（pH 5.0）和tris緩沖液((pH 7.2)，1 mg/mL濃度)中以6%/小時的速率丟失活性。

分析說明

通過縮二脲法測定的蛋白質(zhì)。

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