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細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來(lái)越廣泛。

 

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染：外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但持續(xù)時(shí)間只有幾天（數(shù)天內(nèi)大部分外源性 DNA 會(huì)在核酸酶作用下降解或被細(xì)胞分裂稀釋，一周后便無(wú)法再檢出）。使用超螺旋質(zhì)粒 DNA 進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的效率高，因?yàn)槠淠鼙患?xì)胞更高效地?cái)z取。

 

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：外源性DNA可以整合至細(xì)胞基因組中，或者作為游離型質(zhì)粒存在，并可傳遞至轉(zhuǎn)染細(xì)胞的子代。但通常只有單個(gè)或幾個(gè)拷貝的外源性DNA整合至穩(wěn)定轉(zhuǎn)染基因組中，因此穩(wěn)定轉(zhuǎn)染基因的表達(dá)水平一般低于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染基因的表達(dá)水平。由于外源性DNA穩(wěn)定整合至基因組的概率很低，因此通常在用于轉(zhuǎn)染的DNA構(gòu)建體中納入可篩選標(biāo)記物（如對(duì)各種篩選藥物產(chǎn)生抗性的基因，或是可對(duì)待轉(zhuǎn)染細(xì)胞系有缺陷的必需基因進(jìn)行補(bǔ)償?shù)幕颍?，然后在短暫的恢?fù)期后對(duì)細(xì)胞施加適當(dāng)?shù)暮Y選壓力。