胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分zui少。

做細(xì)胞培養(yǎng)的都知道血清對于細(xì)胞生長是十分重要的,其大部分成分已為人所知,但仍有一小部分特殊成分扔不清楚。血清成分有下面幾大類:
1.蛋白質(zhì)類
包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;
2.多肽類
主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;
3.激素類
激素對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:
胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);
類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:
促生長激素:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);
CAS#: 50-23-7:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的CAS#: 50-23-7,在細(xì)胞密度較高時可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。
4.其他成分
如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯,與蛋白相結(jié)合的微量元素對細(xì)胞生長起促進(jìn)作用。
胎牛血清注意事項(xiàng):
1. 血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶,建議無菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
2. 血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
3.無血清培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。