血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400轉(zhuǎn)/分離心1-2分鐘,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。最好不使用過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。在解凍血清時(shí),建議隨時(shí)將血清搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,常見(jiàn)的原因之一是融化過(guò)程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。
為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?
在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時(shí)處于溶解狀態(tài),在凍融過(guò)程中會(huì)發(fā)生聚集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長(zhǎng)時(shí)間放置。