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D2650-DMSO二甲基亞砜
  • D2650-DMSO二甲基亞砜
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貨物所在地:天津天津市

地: 柏萊源(天津)生物科技有限公司

更新時間:2024-11-01 14:04:13

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DMSO二甲基亞砜是一種用于化學(xué)反應(yīng)(如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR))的極性非質(zhì)子溶劑,也可作為冷凍保護(hù)玻璃化劑用于保存細(xì)胞、組織和器官。DMSO 可在細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基中用于保護(hù)細(xì)胞免受冰晶導(dǎo)致的機(jī)械損傷。它可用于原代、繼代培養(yǎng)和重組的異倍體和雜交瘤細(xì)胞系、胚胎干細(xì)胞 (ESC) 以及造血干細(xì)胞的凍存。DMSO 常與 BSA 或胎牛血清 (FBS) 一同使用。

【產(chǎn)品名稱】DMSO二甲基亞砜

【產(chǎn)品規(guī)格】100ml

【產(chǎn)品品牌】sigma

【產(chǎn)品庫存】現(xiàn)貨

【產(chǎn)品簡介】DMSO二甲基亞砜是一種滲透性保護(hù)劑,用途廣泛,能夠降低細(xì)胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。

【產(chǎn)品應(yīng)用】二甲基亞砜是一種用于化學(xué)反應(yīng)(如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR))的極性非質(zhì)子溶劑,也可作為冷凍保護(hù)玻璃化劑用于保存細(xì)胞、組織和器官。DMSO 可在細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基中用于保護(hù)細(xì)胞免受冰晶導(dǎo)致的機(jī)械損傷。它可用于原代、繼代培養(yǎng)和重組的異倍體和雜交瘤細(xì)胞系、胚胎干細(xì)胞 (ESC) 以及造血干細(xì)胞的凍存。DMSO 常與 BSA 或胎牛血清 (FBS) 一同使用。

【注意】在室溫下容易過冷并緩慢重融。 固化產(chǎn)品可以通過加熱至室溫來重新液化,而不會損害產(chǎn)品。用的時候要避免其揮發(fā),因此需要準(zhǔn)備1%-5%的氨水備用。若皮膚不慎沾上后,可用大量的清水及稀氨水沖洗。                  

D2650.png



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【凍存程序】

 以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞,如果必要,可以適當(dāng)調(diào)整。凍存培養(yǎng)基的配方請參考其細(xì)胞說明書。


1.凍存前先檢測細(xì)胞是否受到細(xì)菌、真菌、支原體和病毒的污染。通常凍存后10-14天才能得到污染檢測結(jié)果,如果確定有污染,應(yīng)將該細(xì)胞銷毀。


2.凍存培養(yǎng)基由wan全培養(yǎng)基和5% DMSO(sigma D2650)組成。由于DMSO的溶解會放熱,所以不能向細(xì)胞懸液中直接加入未稀釋的DMSO。


3.以溫和速度(125g×10 min)離心收集細(xì)胞,并以1×10*6-5×10*6活細(xì)胞/ml的密度重懸細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞直到復(fù)蘇后細(xì)胞活性得以確定。


4.在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞名稱,編號和凍存日期等信息。然后每管加入1-1.8 ml細(xì)胞懸液(視凍存管體積)并密封。


5.室溫條件下,將細(xì)胞在凍存培養(yǎng)基中平衡15-40 min(勿超)。這段時間中,可以將細(xì)胞懸液等分加入凍存管中。40min后,細(xì)胞活性可能會受到DMSO的影響而下降。


6.將凍存管置于已預(yù)冷至4℃的程序降溫盒,并將降溫盒置于-70℃(或更冷)的冰箱中至少24小時?;蛘?,使用已預(yù)冷至4℃的可編程電子降溫系統(tǒng)以1℃/min的速度將凍存管降溫至-40℃以下,然后迅速降至-130℃。


7.將凍存管迅速轉(zhuǎn)移至液氮罐或者-130℃冰箱。通常,冷凍的細(xì)胞會以10℃/min的速度升溫,一旦達(dá)到-50℃以上,細(xì)胞會劇烈受損。


8.記錄凍存位置和過程細(xì)節(jié)等信息。


9.置于-130℃ 24小時后,取出一只凍存管并復(fù)蘇,以測定細(xì)胞活性和是否污染。



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