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上海語純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年CC96194BL21感受態(tài)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- CC96194 產(chǎn)品型號(hào)
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：36更新時(shí)間：2025-04-24 10:18:12
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10*100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CC96194 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：CC96194
產(chǎn)品規(guī)格：10*100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
BL21感受態(tài)
產(chǎn)品概述
產(chǎn)品描述
BL21是最早開發(fā)的用于原核表達(dá)的菌株，BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達(dá)菌株均來源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達(dá)，不含T7 RNA聚合酶，所以不能用于由T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的蛋白表達(dá)(如：pET系列)；但含有大腸桿菌RNA聚合酶，適合依賴于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如：pGEX，pMAL質(zhì)粒)。其中ompT可減少外膜蛋白酶的表達(dá)量，從而減少重組蛋白的水解，提高表達(dá)產(chǎn)量；hsd基因變異可致菌株細(xì)胞內(nèi)的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失，從而提高PCR產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化效率。BL21感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)107 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
? 高轉(zhuǎn)化效率：>1x107 cfu/µg pUC19 DNA
? 適合依賴于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)
產(chǎn)品組分
組分 | CC96194-01 | CC96194-02 |
BL21感受態(tài)細(xì)胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL |
基因型：E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
產(chǎn)品應(yīng)用
BL21感受態(tài)細(xì)胞適用于依賴于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如：pGEX，pMAL質(zhì)粒)。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 解凍感受態(tài)細(xì)胞：從-80 ℃取感受態(tài)細(xì)胞，放置在冰浴或冰水浴中融化，約5-10 min，放置時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率。
2. DNA樣品的轉(zhuǎn)化：每100 μL感受態(tài)加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品(例如質(zhì)粒、連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物等)約10 μL，然后輕輕彈擊管底約2-3次，立即冰上靜置孵育30 min。
? 加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品體積通常不宜超過感受態(tài)細(xì)胞體積的10%。
? 加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品后應(yīng)輕柔操作，避免使用移液槍吹打混勻。
? 如果用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化擴(kuò)增，冰浴靜置約10 min后可以直接涂板并培養(yǎng)過夜；如果用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，建議冰浴靜置30分鐘并嚴(yán)格執(zhí)行后續(xù)的熱激處理和復(fù)蘇培養(yǎng)等步驟，以提高轉(zhuǎn)化效率。
3. 熱激處理：將冰浴后的離心管快速置于42℃水浴中，靜置熱激90 s。隨后立即轉(zhuǎn)移至冰水浴中靜置2-3 min以快速冷卻。
? 熱激及轉(zhuǎn)移至冰浴過程中請(qǐng)勿晃動(dòng)離心管。
4. 復(fù)蘇培養(yǎng)：加入900 μL 37℃預(yù)熱的LB或SOC培養(yǎng)基，顛倒數(shù)次混勻，37℃搖床約220 rpm復(fù)蘇培養(yǎng)45 min。
5. 收菌涂板：如果用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化擴(kuò)增，建議直接取50-100 μL進(jìn)行涂板即可；如果用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，建議先5000 g，1 min室溫離心沉淀細(xì)菌，吸除約900-950 μL上清，然后用剩余的約50-100 μL菌液重懸，涂布到含相應(yīng)抗生素的LB平板上。
6. 過夜培養(yǎng)：將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
? 培養(yǎng)前需要將平板在超凈臺(tái)中稍微晾至無明顯水漬，有利于形成單克隆。
保存條件
-80℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。
相關(guān)參數(shù)
感受態(tài)類型 | 化學(xué)感受態(tài) |
感受態(tài)菌株名稱 | BL21 |
種屬 | 大腸桿菌 |
轉(zhuǎn)化效率 | 高效率 (>1x10^7 cfu/µg pUC19 DNA) |
菌株用途 | 表達(dá) |
應(yīng)用特征 | 適用于依賴于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá) |
是否可進(jìn)行藍(lán)白斑篩選 | 否 |
菌株抗性 | - |
培養(yǎng)基 | LB |
培養(yǎng)條件 | 37℃，有氧 |
誘導(dǎo)方法 | - |
保存條件 | -80℃ |
運(yùn)輸條件 | 干冰 |
包裝規(guī)格 | 管裝 (100 µL/管) |
BL21感受態(tài)
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