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目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒

豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒
  • 豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒
參考價(jià) 2800
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
2800
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 烜雅生物
  • 型號(hào) 50T
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2025-03-20 15:13:14瀏覽次數(shù):48評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/盒
貨號(hào) XY-D-0267 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Viru
保存條件 -20℃±5℃,避光保存 有效期 12個(gè)月
豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒用一對(duì)豬藍(lán)耳病病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)豬藍(lán)耳病病毒的 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于對(duì)可疑感染病料的病原學(xué)診斷。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome, PRRS),又稱藍(lán)耳病,是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起豬的高度接觸性傳染病,我國(guó)列為二類傳染病。該病的主要臨床特征為:厭食,發(fā)熱,母豬    流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、產(chǎn)弱胎和木乃伊胎以及各種年齡豬呼吸困難。根據(jù)基因型和抗原性的差異,PRRSV 通常被分為歐洲型和美洲型,我國(guó)主要流行的是美洲型 PRRSV,但近幾年我國(guó)多地區(qū)也相繼分離到歐洲型 PRRSV。

本試劑盒適用于檢測(cè)肺、扁桃體和口腔拭子、全血等標(biāo)本中豬藍(lán)耳病病毒 RNA,適用于豬藍(lán)耳病病毒感染的輔助診斷。


產(chǎn)品特點(diǎn):

一、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,讓您的檢測(cè)結(jié)果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化,具有出色的靈敏度,能夠檢測(cè)到極微量的豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型核酸,不放過(guò)任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。

三、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性,研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測(cè)驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過(guò)多種樣本的檢測(cè)驗(yàn)證,適用于肺、扁桃體和口腔拭子、全血等多種常見樣本,滿足不同的檢測(cè)需求。

五、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù),根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,為您提供更貼合實(shí)際的檢測(cè)方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,滿足您在不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),在您購(gòu)買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,購(gòu)買后為您解決使用過(guò)程中遇到的任何問(wèn)題,讓您無(wú)后顧之憂。


產(chǎn)品參數(shù):

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒,可滿足一定規(guī)模的檢測(cè)需求。

檢測(cè)方法

實(shí)時(shí)熒光PCR,具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

標(biāo)本采集

病死或撲殺豬,取肺臟、淋巴結(jié)、扁桃體、脾臟等組織;待檢活豬,取口腔拭子或取血 5mL;公豬可采集精液。

血清樣品采集:用無(wú)菌-注射器抽取受檢豬靜脈血不少于 5mL,置于無(wú)菌離心管內(nèi),2000r/min~3000r/min 離

心 10min,吸取上清液到新的離心管內(nèi)備用。公豬精液:按照 GB/T25172-2020 的方法采集和保存精液??谇皇米樱捍筘i使用保定器保定,小豬可以雙手保定,用采樣拭子蘸取口腔分泌物,放入無(wú)菌采樣管中。肺灌洗液:完    整摘取肺臟/肺葉,送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行灌洗。組織樣品:取肺臟、淋巴結(jié)、扁桃體、脾臟等組織,置于無(wú)菌離心管內(nèi)備用。

保存和運(yùn)輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò) 24 h;若需長(zhǎng)期保存,應(yīng)放置-70℃以下保存,凍融不超過(guò) 3 次。


使用方法:

1.樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

血清和精液樣品:無(wú)需進(jìn)行前處理,直接用于核酸提取;口腔拭子樣品:加入 500μL 無(wú)菌 PBS,充分渦旋震蕩 1min,反復(fù)擠壓拭子,棄去拭子后 3000r/min 離心 5min,取上清用于后續(xù)的核酸提取。肺灌洗液:根據(jù)肺臟/肺葉的大小,通過(guò)肺管加入 5mL~10mL 無(wú)菌 PBS,反復(fù)揉捏,吸取灌洗液,3000r/min 離心 5 min,取上清用于核酸提取。組織樣品:取 1g 組織,剪碎,加人 2mL 生理鹽水進(jìn)行研磨,制備組織勻漿,8000r/min 離心 5min, 取上清用于后續(xù)的核酸提取。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提取,請(qǐng)    按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作。

2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照;反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑PRRSV-U 反應(yīng)液酶液

用量19μL1μL

 

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,20μL/管。

3.加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的核酸、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;熒光通道選擇:檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)

11 cycle50℃10min

21 cycle95℃2min

345 cycles95℃15sec

60℃30sec

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請(qǐng)參照各儀器使用說(shuō)明書進(jìn)行設(shè)置,以分析 ABI7500 儀器為例)

反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整,Start 值可設(shè)在 3~15、End 值可設(shè)在 5~20,使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期,陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線),點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤40,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線; 陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>40 或無(wú) Ct 值。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:無(wú)特異性擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示;

陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

6.檢測(cè)方法的局限性

1.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

2.樣本提取過(guò)程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;

3.陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;

4.病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

5.不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

6.試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;

7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。


注意事項(xiàng):

1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完-全混勻并短暫離心;

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型PCR試劑盒,就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航!

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