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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中鹿源性成分的檢測。檢測結(jié)果僅供參考。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測結(jié)果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的鹿源性成分核酸，不放過任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。

三、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗(yàn)證，適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù)，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實(shí)際的檢測方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了鹿源性成分（Deer）熒光PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，在您購買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實(shí)時(shí)熒光PCR，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標(biāo)本采集

取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g，轉(zhuǎn)至含 1.5mL 無菌生理鹽水的潔凈離心管送檢。

保存和運(yùn)輸

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 0℃冰壺。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1參照 SN/T2980-2011 標(biāo)準(zhǔn)的提取方法，如下：

1.1.1試劑配置

1)1mol/L Tris-Cl（pH8.0）：稱取 Tris 121.1g，加入 ddH2O 800mL 溶解，冷卻至室溫后弄 3M 濃鹽酸調(diào) PH 至 8.0，加 ddH2O 定容至 1L，分裝滅菌。

2)CTAB 裂解液：800mLddH2O 加入 40.95g NaCl，10g CTAB（十六烷基三甲基溴-化銨）；完-全溶解后加入 1mol/L Tris-Cl（pH8.0）50mL，0.5mol/L EDTA

（pH8.0）20mL，磁力攪拌器劇烈攪動(dòng)拌用氫氧化鈉調(diào)節(jié) pH 至 8.0，水定容至1L，分裝滅菌；

1.1.2DNA 提取

取 100mg 左右樣品于 1.5mL 離心管中，加入 600-800μL 預(yù)冷的 CTAB 裂解液， 65℃水浴 30min，每隔 10min，振蕩混勻一次；100℃沸水浴 5min；12000r/min離心 5min，吸取上清液至一新的離心管中，加 400μL 氯仿+異戊醇混合液（體積比 24：1），充分混勻后 12000r/min 離心 10min，吸取上清液至新的離心管中，加0.8 倍體積的異丙醇，-20℃下沉淀DNA 30min；12000r/min 離心10min，棄去上清液；75%乙醇輕柔地洗滌沉淀一次，12000r/min 離心 8min，棄液體， 晾干；加入 100μL 1xTE，充分溶解沉淀;

1.2核酸稀釋（油脂類飼料不必進(jìn)行此步驟）

提取的 DNA 用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行濃度測定，取 5μL 提取好的 DNA，1mL ddH2O，用 ddH2O 做對(duì)照，測定 260nm 和 280nm 的吸光度 A260 和 A280，DNA 的濃度 c=A260x10μg/μL（當(dāng) A260/A280 比值在 1.7~1.9 之間時(shí)，DNA 模版純度適宜擴(kuò)增）。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份)，每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑Deer 反應(yīng)液酶液

用量20μL1μL

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul；熒光通道選擇： 檢測通道

（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請(qǐng)勿選擇ROX 參比熒光。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)

11 cycle95℃10min否

240 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。

5.2判斷

a)檢測通道 Ct 值≤30，有 FAM 熒光信號(hào)檢出，并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，判斷樣品為陽性。

b)當(dāng) 30<Ct 值≤35 時(shí)，且有典型的擴(kuò)增曲線時(shí)，則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。再次擴(kuò)增后檢測體系的Ct 值仍≤35，且有典型的擴(kuò)增曲線，則判定該樣品含有相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。當(dāng)再次擴(kuò)增后，檢測體系 Ct 值＞35，或無典型的擴(kuò)增曲線，則判定該樣品不含相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。

6.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

a)空白對(duì)照：無FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35，未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。

b)陰性對(duì)照：無FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35，未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。

c)陽性對(duì)照：有 FAM 熒光信號(hào)檢出，并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，Ct 值＜30。

d)以上應(yīng)同時(shí)滿足，否則本次實(shí)驗(yàn)無效。

7.檢測方法的局限性

7.1樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

7.2樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

7.3陽性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

7.4病原體在流行過程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

7.5不同的提取方法存在提取效率差異，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

7.6試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；

7.7本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的鹿源性成分（Deer）熒光PCR檢測試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！