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產(chǎn)品簡介：

口蹄疫(Foot and mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV)感染引起偶蹄動物的一種急性、烈性、接觸性傳染病。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將口蹄疫列為必須報告的動物傳染病，我國   規(guī)定口蹄疫為一類動物疫病。

口蹄疫的傳染源主要為潛伏期感染及臨床發(fā)病動物。易感動物可通過呼吸道、消化道、生殖道和傷口感染病毒，通常以直接或間接接觸（飛沫等）方式傳播，或通過人或犬、蠅、蟬、等動物媒介。感染動物呼出物、   唾液、糞便、尿液、乳、精液及肉和副產(chǎn)品均可帶毒。牛羊等反芻動物感染后，病毒可在食道-咽喉部持續(xù)帶毒。該病可分為 O、A、C、南非 I 型、南非 II 型、南 III 型和亞洲 I 型等血清型，其中以 O 型和 A 型和亞洲 1 型分布最-廣，危害最大。

本試劑盒適用于檢測口蹄疫易感動物的水泡液、水泡皮、組織樣品、反芻動物 O-P 液樣品及血清樣品中的O 型和 A 型口蹄疫病毒，適用于 O 型和 A 型口蹄疫病毒感染的輔助診斷。

產(chǎn)品特點：

一、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測結(jié)果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的口蹄疫病毒O型/A型核酸，不放過任何潛在的感染風(fēng)險。

三、便捷操作

綜合各項指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證，適用于水泡液、水泡皮、組織樣品、反芻動物 O-P 液樣品及血清等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊可為您提供個性化的定制服務(wù)，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了口蹄疫病毒O型/A型(FMDV-O/-A)PCR試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊，在您購買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標(biāo)本采集

水泡液采集：典型臨床發(fā)病動物水泡液用滅菌注射器吸出后裝入樣品保存管，加青-霉素 1000 IU/mL、鏈霉-素 500 IU/ mL，加蓋封口，冷凍保存。

其它樣品采集參考 GB/T 18935-2018《口蹄疫診斷技術(shù)》[1]中（5.3.2 章節(jié)）水泡皮樣品采集，（5.3.3 章節(jié)）組織樣品采集、（5.3.4 章節(jié)）反芻動物 O-P 液樣品采集、（5.3.5 章節(jié)）血清樣品采集進(jìn)行規(guī)范采集。

保存和運輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h；若需長期保存，應(yīng)放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣品處理區(qū)）

1.1樣品前處理

水泡液樣品：水泡液以 3000 r/ min 離心 10 min，取上清液備用。

水泡皮樣品處理，組織樣品處理、反芻動物 O-P 液樣品處理，血清樣品處理參考 GB/T 18935-2018《口蹄疫診斷技術(shù)》[1]進(jìn)行規(guī)范處理。

1.2核酸提取

推薦采用公司生產(chǎn)的核酸-提取試劑（離心柱法）進(jìn)行核酸提取，請按照試劑說明書進(jìn)    行操作。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣品總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N（N=樣品數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份），每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑FMDV-O/-A 反應(yīng)液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，20μL/管。

3.加樣（樣品處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻， 短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM、VIC， 淬滅通道（Quencher Dye）選擇 NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整， Start 值可設(shè)在 3～ 15、End 值可設(shè)在 5～ 20 ， 使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

FAM 通道為口蹄疫 O 型檢測結(jié)果，VIC 通道為口蹄疫 A 型檢測結(jié)果陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；

陰性：樣品檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無特異性擴(kuò)增曲線或無 Ct 值；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時滿足，否則實驗視為無效。

6.檢測方法的局限性

1.樣品檢測結(jié)果與樣品收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

2.樣品提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

3.陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

6.試劑運輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；

7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項：

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的口蹄疫病毒O型/A型(FMDV-O/-A)PCR試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護(hù)航！