中藥材的種類多成分復雜，而農(nóng)藥殘留分析屬于痕量分析，極易被中藥成分所干擾。因此2020版中國藥典第五法中, 提供了直接提取法,快速處理法和3種固相萃取法對基質(zhì)樣品進行凈化, 并要求做空白基質(zhì)加標曲線、 來減輕基質(zhì)效應對檢測結(jié)果的影響。
安譜實驗做了大量實驗摸索, 在中藥禁用農(nóng)藥檢測上積累了豐富的經(jīng)驗, 在此以一味藥材--金銀花中的農(nóng)藥殘留檢測為例, 講解下具體工作中如何進行條件選取:
推薦的凈化方法和標準品搭配
實驗數(shù)據(jù)
一、基質(zhì)：金銀花
二、基質(zhì)樣品的前處理
1.快速樣品處理法（QuEChERS）法
產(chǎn)品特色：
★ 超潔凈填料，嚴控本底
★ 多管漩渦混合器，一次性可以處理50個樣品，可以提高數(shù)據(jù)的平行性
2.固相萃取凈化方式一：分散性固相萃取法（dSPE）
產(chǎn)品特色：
★ 超潔凈填料，嚴控本底
3.固相萃取凈化方式二：HLB SPE固相萃取法
產(chǎn)品特色：
★ 填料自產(chǎn)，嚴格質(zhì)控，易把控；
★ 極性、非極性化合物都有較高回收率；
★ 極duan耐酸堿下也有很好的回收率；
★ 特別適用于復雜基質(zhì)，流速快，過柱時間短。
4.固相萃取凈化方式三：石墨化碳氨基復合固相萃取法
產(chǎn)品特色：
★ 填料自產(chǎn)，嚴格質(zhì)控，易把控；
★ 農(nóng)藥多殘留檢測jia選擇。
三、分析條件
1.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
色譜柱：GAEQ-501222 CD-50氣相毛細管色譜柱 30m*0.25mm*0.25um
進樣口溫度：250℃
分流模式：不分流進樣
控制模式：恒壓，柱前壓力為146kPa
升溫程序：初始溫度60℃，保持1分鐘，以每分鐘10℃的速率升溫至160℃，再以每分鐘2℃ 的速率升溫至230℃，后以每分鐘15℃的速率升溫至300℃，保持6分鐘。
檢測器：三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀
離子源：電子轟擊源（EI）
離子源溫度：250℃
傳輸接口溫度：250℃
質(zhì)譜監(jiān)測模式：多反應監(jiān)測（MRM）
2.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
色譜柱：LAEQ-2110I1 CNWShell C18 液相核殼色譜柱 2.1 × 100mm，2.6um
流動相：A相 0.1％甲酸溶液（含5mmol/L甲酸銨）
B相 乙腈- 0.1％ 甲酸溶液（含5mmol/L甲酸銨）（95:5）
流速：0.3mL/min
柱溫：40℃
離子化模式：ESI，正離子模式分析
監(jiān)測模式：多反應監(jiān)測（MRM）
四、實驗結(jié)果
1.金銀花基質(zhì)基質(zhì)樣品方法篩查譜圖信息
2.金銀花樣品方法篩選實驗回收率數(shù)據(jù)
經(jīng)驗分享
1.根據(jù)GC-MS/MS和LC-MS/MS的譜圖分析，不同前處理方法的凈化效果各有不同，總體來看，固相萃取法的凈化效果要相對好于快速Q(mào)uEChERS方法。不同基質(zhì)的凈化情況可能不盡相同。
2.根據(jù)回收率數(shù)據(jù)分析，GC-MS/MS和LC-MS/MS兩種儀器上，重復的目標物只要有一種儀器滿足要求即可；金銀花樣品GC-MS/MS，方式一和方式二回收率基本滿足要求，均在60%-120%之間；LC-MS/MS儀器，快速Q(mào)uEChERS方法基本滿足要求，回收率較差的殺chong脒和水胺硫磷可使用GC-MS/MS數(shù)據(jù)，HLB方法也基本滿足藥典要求。
3.對兩種儀器回收率的數(shù)據(jù)以及操作的方便性進行綜合考慮，金銀花樣品的you前處理方法是方式二（HLB小柱）凈化。一種凈化方法，一個樣品，可同時滿足GC-MS/MS和LC-MS/MS兩種儀器的檢測需求，且55種目標物均可滿足60%-120%的要求。
4.不同的中藥材基質(zhì)效應并不相同，不同的基質(zhì)可能選擇不同的前處理方法，一種基質(zhì)也可能需要選擇兩種不同的方法綜合進行分析以滿足55種物質(zhì)的回收率。具體哪種基質(zhì)凈化方法更適合特定的藥材，需要進行空白基質(zhì)加標實驗來摸索。推薦優(yōu)先選擇HLB方法和QuEChERS方法進行初步篩選。
安譜實驗
2020版中國藥典禁用農(nóng)藥檢測方法包
01標準品
02超低本底的質(zhì)譜級試劑
03基質(zhì)凈化產(chǎn)品
04色譜柱
05計量器具
06*儀器
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