美國(guó)蘭博柱后衍生-液相色譜法測(cè)定植物油中的AFB1的含量

AFB₁是AF霉菌的代謝產(chǎn)物，廣泛存在于霉變的糧食及由糧食制得的食品和飲料中。AFB有許多種，其中B₁的致癌性zui強(qiáng)，而且化學(xué)結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定，加熱到268 ～ 269℃才分解，普通的食物處理方法不會(huì)減少B1的含量，所以AFB1一旦進(jìn)入人類的食物鏈，會(huì)對(duì)人類身體健康造成極大的危害。1993 年，AFB1被世界衛(wèi)生組織( WHO) 的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物質(zhì)，也是目前食用植物油食品中安全性檢查主要項(xiàng)目之一。

目前AFB1檢測(cè)所用的薄層法測(cè)定AFB1的方法不是專一性的，因有的樣品中其他物質(zhì)亦可產(chǎn)生類似AFB1的藍(lán)紫色熒光點(diǎn)，對(duì)測(cè)定產(chǎn)生干擾，也因此造成樣品處理繁瑣( 要進(jìn)行樣品提取、凈化) ，分析所需時(shí)間長(zhǎng)，而且只能測(cè)定zui*，不能測(cè)定樣品中AFB1的含量。如干擾物的Ｒf 值與AFB1一致，很易造成測(cè)定誤差，所以這種測(cè)定方法只作化學(xué)分析法的一般佐證法。

酶標(biāo)法雖然在使用上比較快速，但與薄層法一樣，均屬于一種半定量的分析方法，重復(fù)性差，試劑壽命短，需低溫保存，假陽(yáng)性概率較高，需要配置專門(mén)的酶標(biāo)儀，在基層檢測(cè)難度較大，對(duì)樣品要求高，對(duì)某些含鹽量高、脂肪含量高的樣品需要進(jìn)行額外的適當(dāng)?shù)奶幚?，該方法通?？梢宰鳛槌鹾Y，對(duì)陽(yáng)性結(jié)果需進(jìn)行進(jìn)一步的確正檢測(cè)。

柱前衍生液相色譜法因其方法上的局限性其衍生的信號(hào)強(qiáng)弱會(huì)因手動(dòng)操作的強(qiáng)弱和時(shí)間等條件的改變而改變，這樣給定量帶來(lái)諸多的誤差。上述這些方法都在樣品處理上較復(fù)雜，靈敏度差，回收率不理想。

天津蘭博應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室采用柱后衍生液相色譜法，得到了很好的結(jié)果。

    Lanbo Series6500液相色譜儀            PCR3柱后衍生系統(tǒng)

儀器:

美國(guó)蘭博液相色譜儀，配熒光檢測(cè)器；

美國(guó)蘭博柱后衍生儀PCR3；渦旋混合振蕩器；超聲波清洗器；電子天平。

柱后衍生液相色譜法

色譜條件：

色譜柱: Zorbax SB C18( 250 mm ×4.6 mm，5 μm) ;

流動(dòng)相: 甲醇-水( 45 ∶ 55) ; 流速: 0.8 ml/min;

柱溫: 35 ℃;

檢測(cè)器: 熒光檢測(cè)器。激發(fā)波長(zhǎng)( λex) :360 nm，發(fā)射波長(zhǎng)( λem) : 420 nm;

進(jìn)樣量: 20 μl;

柱后衍生化系統(tǒng):

衍生溶液: 0.05% 碘溶液;

衍生溶液流速: 0.2 m l/min;

柱后衍生反應(yīng)器溫度: 70℃，反應(yīng)時(shí)間: 1 min。

利用柱后衍生系統(tǒng)和液相色譜相結(jié)合，對(duì)食用油中的AFB1進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)對(duì)色譜條件和樣品處理方法的摸索，得到靈敏度、回收率、精密度較理想的測(cè)試方法，且檢測(cè)所需時(shí)間短，分辨率高，還可對(duì)樣品同時(shí)進(jìn)行定性、定量測(cè)定，利于大量批次樣品檢測(cè)，有條件的實(shí)驗(yàn)可作為常規(guī)手段推廣應(yīng)用。