21
當(dāng)前位置：天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司>>技術(shù)文章>>制備型加壓液相色譜的分類有些哪些
制備型加壓液相色譜的分類有些哪些
制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊，沒有統(tǒng)一、明確的標(biāo)準(zhǔn)。
1、快速色譜
柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對于那些容易分離的簡單混合物，由于快速色譜具有操作簡便、經(jīng)濟等優(yōu)點，常常是實驗室的佳選。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒有壓力，而快速分離通常使用瓶裝氮氣加壓，使流動相具有一定的流速，從而縮短了分離時間。
快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱，柱直徑為3～10cm．長度為7～15cm。快速色譜中使用廣泛的固定相為硅膠。采用的粒徑通常為：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相。其它如鍵合相、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用。
2、低壓色譜（LPLC）
柱壓一般低于5bar（或75psi）。
低壓色譜一般是由蠕動泵、進樣閥和檢測器組成，可以連續(xù)化，實現(xiàn)自動的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的，長度一般為240-440mm，內(nèi)徑為10-40mm。
對于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì)，光學(xué)檢測器很常用。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般為40-60μm。
3、中壓液相色譜（MPLC）
柱壓在5-20bar（或75-300psi）之間，廣泛用于實驗室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液、體液、植物提取液、生物技術(shù)發(fā)酵液等--往往需要經(jīng)過濾膜作初級凈化)的處理，以提取或純化所需的產(chǎn)品。
4、高壓液相色譜(HPLC)
是指柱壓一般大于20bar（或300psi）的“高壓(或)液相色譜”，通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000，一般是在2，000～20，000的范圍之間。
當(dāng)需要從大量的物質(zhì)中分離純化不足1％的所需成分時，分離工作將會十分困難，往往在純化的后階段需要使用10μm或更小顆粒的填料。為獲得所需微量組分，可采用如下分離手段：制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產(chǎn)物。為提高每次分離獲得純品的數(shù)量，制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行。
高壓液相色譜，即目前常用的液相色譜。色譜柱內(nèi)填裝的是粒度范圍較窄的微小顆粒固定相(3～30μm)，為使流動相流出，需采用較高的壓力，同時系統(tǒng)的復(fù)雜性及成本亦增大，但分辨率可得到較大的提高。而填裝較大顆粒的固定相時，如中壓液相色譜系統(tǒng)，裝柱較容易，柱的通透性較高(只需較低的泵壓力)，可采用更大的色譜柱和更經(jīng)濟的儀器，由此分辨率也較低。