由于球與閥座密封不嚴(yán)，導(dǎo)致液體倒流，造成壓力不穩(wěn)，甚至球與閥座粘在一起阻死。為避免單項(xiàng)閥中的寶石球和閥座被污染，流動(dòng)相應(yīng)使用HPLC 級(jí)的溶劑，并且配好的流動(dòng)相一定要用0.45um 濾膜過濾和脫氣。如果泵被微粒污染，可分別用 25ml 水＋25ml 甲醇＋25ml異丙醇＋25ml 二氯甲烷依次沖洗，后再用所用的溶液沖洗整個(gè)系統(tǒng)。注意：沖洗時(shí)應(yīng)打開泄液閥。如果氣泡進(jìn)入閥中，它會(huì)緊貼在閥體的一側(cè)，使寶石球難返回到閥座，引起液體倒流，導(dǎo)致泵的壓力和流速明顯改變。此時(shí)應(yīng)立即打開瀉液閥，大流量（2ml/min）沖洗泵，直至排除液為直線型。如果泵進(jìn)氣泡也可在泵頭上排氣泡，具體做法為：用扳手固定住進(jìn)氣泡的泵頭，擰開輸出管道的壓帽，手動(dòng)泵進(jìn)液，這時(shí)可見到氣泡從孔中擠壓出來，直至無氣泡排出將壓帽擰緊。如果采取上述方法仍不能使壓力穩(wěn)定， 應(yīng)考慮是密封墊圈壞了或單向閥磨損、球不光滑等，需更換部件。

 

    色譜泵墊圈故障

 

    泵墊圈常見的故障是滲漏和墊圈受損污染系統(tǒng)。 液相色譜系統(tǒng)一般情況下不要使用強(qiáng)酸強(qiáng)堿溶液，樣品 PH 值一般調(diào)到中性，才可進(jìn)樣。如果強(qiáng)酸強(qiáng)堿會(huì)損壞密封墊和柱塞桿。密封圈與運(yùn)動(dòng)著的柱塞桿緊密接觸，可使柱塞在泵頭自由運(yùn)動(dòng)而流動(dòng)相不漏出來，它是液相色譜中易磨損的部件。有條件的實(shí)驗(yàn)室可三個(gè)月更換一次墊圈， 以防止泵系統(tǒng)污染。如果用緩沖鹽作流動(dòng)相則更會(huì)加速墊圈的磨損，應(yīng)及時(shí)沖洗。墊圈損壞一般表現(xiàn)為：色譜泵泵壓力不穩(wěn)、泵頭漏液。為避免上述故障的發(fā)生，我們?cè)诜治鲋袘?yīng)注意以下幾點(diǎn)

 

    ② 使用超純水、純度級(jí)別較高的試劑和色譜級(jí)溶劑配制流動(dòng)相；

 

    ②配好的流動(dòng)相一定要抽濾脫氣，即便儀器有在線脫氣裝置，也在上機(jī)前進(jìn)行抽濾；

 

    ③ 泵在啟動(dòng)前一定要通過泄液閥抽凈泵里的空氣；

 

    ④ 用緩沖鹽洗脫時(shí)，分析結(jié)束后一定要用水沖洗泵和整個(gè)流路系統(tǒng)，用有機(jī)溶劑充滿系統(tǒng)。

 

    2 檢測(cè)器的常見故障及對(duì)策

 

    液相色譜儀常用的檢測(cè)器主要有紫外、熒光和電化學(xué)檢測(cè)器三種。這些檢測(cè)器的作用就是收集流經(jīng)色譜分離柱的各組分在檢測(cè)器中的信號(hào)，根據(jù)組份分光吸收值/熒光強(qiáng)度/電極表面電流的變化計(jì)算出組分的濃度。檢測(cè)器常見故障及對(duì)策主要有：

 

    基線噪音較大及對(duì)策

 

    對(duì)于紫外檢測(cè)器，氘燈光源打開后要預(yù)熱 30 分鐘以上，基線才能穩(wěn)定。氘燈用的過久，接近壽命期時(shí)（氘燈的壽命約為 1000 小時(shí)），會(huì)使基線噪音明顯增加，應(yīng)及時(shí)更換氘燈。除光源外，流路中的氣泡也會(huì)產(chǎn)生噪音。那么，怎樣判斷基線噪音增大是由于光源燈的老化還是來自流路中的氣泡呢？首先，可將泵關(guān)閉繼續(xù)走基線，如果噪音立即停止，基線呈一條直線， 說明基線噪音來自流動(dòng)相中的氣泡，應(yīng)設(shè)法排氣。其次，如果停泵后仍有噪音出現(xiàn)，應(yīng)考慮是燈的問題。電化學(xué)檢測(cè)器中的工作電極對(duì)氣泡十分敏感，儀器的平衡時(shí)

 

    間較長(zhǎng)，流路中如果有氣泡存在，不僅基線會(huì)出現(xiàn)尖峰，還會(huì)影響檢測(cè)。因此，做電化學(xué)檢測(cè)時(shí)，流動(dòng)相的配制要很嚴(yán)格。水要超純、除還原物外配好后一定要過濾脫氣，還應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。如果泵系統(tǒng)不是 YK 材料，即電化學(xué)分析儀器，而是普通的液相色譜不銹鋼泵，在分析前應(yīng)對(duì)系統(tǒng)中的輸液泵、進(jìn)樣器和管道用 6moUL 硝酸溶液鈍化（注意斷開分離柱）或在流動(dòng)相中加入 EDTA 離子隱蔽劑可縮短基線平衡時(shí)間。如果有較大的氣泡進(jìn)到檢測(cè)器中，光靠泵沖有時(shí)太慢，可暫時(shí)將泵停止，關(guān)上電化學(xué)檢測(cè)器，拆下工作電極，用超純水沖洗電極表面，但對(duì)液相色譜技術(shù)不太熟練的技術(shù)員要小心操作，不宜反復(fù)這樣拆卸。