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天津市蘭博實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司

血液中乙醇濃度的氣相色譜分析

時(shí)間:2015-2-6 閱讀:1771
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血液中乙醇濃度的氣相色譜分析

過(guò)量飲酒已經(jīng)成為世界公共衛(wèi)生的主要問(wèn)題,目前我國(guó)對(duì)飲酒量檢測(cè)主要通過(guò)檢測(cè)血液中的乙醇濃度。

血液中乙醇濃度的測(cè)定有化學(xué)法、傳感器法、酶法和氣相色譜法等,其中氣相色譜法是目前使用較普遍的方法。本文利用乙醇的易揮發(fā)性,以叔丁醇為內(nèi)標(biāo),用頂空自動(dòng)進(jìn)樣氣相色譜,火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),建立的方法樣品用量少,操作簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確度高,能對(duì)血液中的乙醇進(jìn)行可靠分析。

1設(shè)備

氣相色譜儀:天津蘭博GC6500氣相色譜儀,配FID檢測(cè)器,頂空自動(dòng)進(jìn)樣器。

2 試劑

乙醇,叔丁醇均為色譜純。

3 分析步驟

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

 用移液槍分別取0.10 ml配制成不同濃度的乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10 mg/ml、0.20 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、3.00 mg/ml)加入預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液(濃度為0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶?jī)?nèi),用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋,混勻,置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定。以乙醇濃度為橫坐標(biāo),乙醇對(duì)叔丁醇的峰面積比為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.2 樣品分析

用移液槍移取0.10 mL待測(cè)血液樣品于預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液(濃度為 0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶?jī)?nèi),用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋,混勻,置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定。

3.3色譜條件

色譜柱:GDX-102(60目~80)填充色譜柱(2 m × 3 mm);

載氣:高純氮?dú)猓魉?0.0 ml/min;

氫氣:30 ml/min;空氣:300 ml/min;尾吹氣:28 ml/min;

進(jìn)樣器溫度:150℃;檢測(cè)器溫度:250℃;

柱溫:70℃;

進(jìn)樣量:1.0 ml,分流比:5:1;

頂空條件:樣品瓶溫度70℃,平衡時(shí)間15 min,進(jìn)樣閥溫度:105℃,管路溫度110℃。

3.4結(jié)果與討論

在規(guī)定的色譜條件下進(jìn)樣,以乙醇濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo),繪制工作曲線。建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.7092x+0.0468,r=0.998。標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖1所示。

 

乙醇和叔丁醇色譜圖


空白血中分別加入不同量的乙醇后制成不同濃度的三份樣品,以上面的條件每份樣品重復(fù)測(cè)定6次,平均回收率在97.8% ~104.3%之間,RSD在2.0%以下,結(jié)果見(jiàn)表1。

回收率與精密度試驗(yàn)結(jié)果(n=6

樣品

加標(biāo)值(mg/ml

測(cè)定平均值(mg/ml

平均回收率(%

RSD%

1

0.73

0.74

101.3

1.5

2

0.93

0.91

97.8

1.1

3

1.44

1.42

98.6

0.9


4結(jié)論

  本文建立的自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定血液中的乙醇方法,操作簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確度高,能滿足血液中乙醇含量的檢驗(yàn)要求,自動(dòng)化程度高,分析時(shí)間短,適合批量樣品檢驗(yàn)需求。


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