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定量蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜采集技術(shù)進(jìn)展

閱讀:425      發(fā)布時間:2019-01-22
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當(dāng)今蛋白質(zhì)組學(xué)的關(guān)注焦點(diǎn)和研究趨勢已經(jīng)逐漸從定性分析轉(zhuǎn)向定量分析。 定量蛋白質(zhì)組學(xué)是對 細(xì)胞、組織乃至完整生物體的蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行定量分析,對生物過程機(jī)理的探索和臨床診斷標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn) 與驗(yàn)證具有重要意義[1,2] 。 定量蛋白質(zhì)組學(xué)分為相對定量與定量[3] 。 相對定量即差異比較,通過質(zhì)譜 大規(guī)模、高通量地對兩種或多種不同生理、病理?xiàng)l件下的樣本進(jìn)行定量分析,獲得蛋白質(zhì)表達(dá)量的差 異,主要方法有穩(wěn)定同位素標(biāo)記和非標(biāo)記兩種技術(shù)手段[4,5] 。 定量即獲得蛋白的具體表達(dá)量,利用 質(zhì)譜監(jiān)測目標(biāo)蛋白的專一性肽段(Unique Peptide)獲得色譜鄄質(zhì)譜峰面積,并與已知量的標(biāo)準(zhǔn)肽段(外標(biāo) 法)或穩(wěn)定同位素標(biāo)記的重標(biāo)肽段(內(nèi)標(biāo)法)比較確定具體量,實(shí)現(xiàn)定量。 主要質(zhì)譜方法是對專一 性肽段進(jìn)行選擇反應(yīng)監(jiān)測或稱多反應(yīng)監(jiān)測(Selected / Multiple reaction monitoring, SRM/ MRM) [6] 。

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