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北京來亨科學(xué)儀器有限公司

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蛋白質(zhì)的脲梯度電泳

閱讀:468      發(fā)布時(shí)間:2018-10-16
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一、實(shí)驗(yàn)原理

近年來,聚丙烯酰胺脲梯度電泳成為研究蛋白質(zhì)去折疊與再折疊的非常重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。脲梯度電泳的基本原理是在常規(guī)的聚丙烯酰胺凝膠中加入非離子型變性劑-尿素,使其形成脲濃度梯度。

 

電泳時(shí)將脲梯度置于垂直電泳方向,使同一蛋白質(zhì)樣品在連續(xù)變化的不同濃度的脲環(huán)境中電泳,蛋白質(zhì)分子隨脲濃度變化而發(fā)生的結(jié)構(gòu)狀態(tài)的變化,因而表現(xiàn)出不同的遷移率,終在顯色后的凝膠中呈現(xiàn)出反映蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的二維圖像。

二、實(shí)驗(yàn)用品

  (一)器材

(1)Bio-Rad公司垂直板型電泳裝置。

(2)蠕動(dòng)泵。

(3)梯度混合器、電磁攪拌器及電磁攪拌子。

(4)1ml 和100µL微量進(jìn)樣器,注膠用的細(xì)長(zhǎng)針管。

(二)試劑  

(1)電極緩沖液的選擇:緩沖液的選擇取決于樣品蛋白質(zhì)的性質(zhì),如等電點(diǎn)、溶解度、穩(wěn)定性和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡取?/span>

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