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SAKUMA細(xì)菌多點(diǎn)接種儀在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
4種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素對(duì)臨床分離致病菌的體外抗菌活性
發(fā)表時(shí)間：2013年6月
【摘要】 目的 對(duì)比研究頭孢呋辛、頭孢克洛、頭孢噻肟和阿莫西林等4種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素對(duì)隨機(jī)選取的臨床分離致病菌的體外抗菌活性。方法 隨機(jī)收集2006～2007年301總醫(yī)院微生物科和空總醫(yī)院感染控制科分離的部分臨床致病菌，采用瓊脂平板稀釋法測(cè)定zui低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果 頭孢呋辛對(duì)金葡菌、表葡菌的敏感率分別為45%、83.33%，抗菌活性顯著強(qiáng)于頭孢克洛，對(duì)肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌及不動(dòng)桿菌的敏感率分別為38.10%、30.77%、0、0，高于阿莫西林，弱于頭孢噻肟。結(jié)論 第二代頭孢菌素目前對(duì)大部分革蘭陽(yáng)性菌仍具有較強(qiáng)的抗菌活性，但對(duì)革蘭陰性菌的抗菌活性明顯弱于第三代頭孢菌素。
【關(guān)鍵詞】 頭孢呋辛 頭孢克洛 頭孢噻肟 阿莫西林 MIC 體外抗菌活性
阿莫西林為半合成青霉素類(lèi)抗生素，作用同青霉素，但對(duì)流感嗜血菌、大腸埃希菌、奇異變形菌、沙門(mén)菌屬、痢疾志賀菌、腦膜炎奈瑟菌和不產(chǎn)酶的淋病奈瑟菌等革蘭陰性菌有很強(qiáng)的抗菌作用。頭孢呋辛及頭孢克洛為第二代頭孢菌素，對(duì)金葡菌(包括耐青霉素者)、表葡菌等革蘭陽(yáng)性菌及流感桿菌、化膿性鏈球菌、大腸埃希菌、梭狀芽胞桿菌、奇異變形桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌沙門(mén)菌、奈瑟球菌屬(包括產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶者)、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、志賀菌及百日咳桿菌等絕大多數(shù)革蘭陰性菌有較強(qiáng)的抗菌活性。頭孢噻肟為半合成第三代頭孢菌素，抗菌譜廣，以革蘭陰性菌為主，對(duì)大腸埃希菌、克雷伯菌屬、沙門(mén)菌屬、普通變形菌、流感嗜血菌、淋病奈瑟桿菌作用強(qiáng)，對(duì)肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌也有較強(qiáng)作用，對(duì)銅綠膿假單胞菌和脆弱擬桿菌作用較差。
本文擬測(cè)試阿莫西林、頭孢呋辛、頭孢克洛和頭孢噻肟等4種臨床常用的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素對(duì)北京兩家**醫(yī)院隨機(jī)收集的2006～2007年的部分臨床分離致病菌的體外抗菌活性，為臨床合理使用抗菌藥治療敏感菌引起的細(xì)菌感染提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 細(xì)菌
105株細(xì)菌是隨機(jī)收集的2006～2007年301總醫(yī)院微生物科和空總醫(yī)院感染控制科分離的部分臨床致病菌，全部經(jīng)VITEK全自動(dòng)微生物分析儀鑒定，包括金葡菌20株、表葡菌18株、大腸埃希菌26株、肺炎克雷伯菌21株、不動(dòng)桿菌8株、陰溝腸桿菌12株。測(cè)定后發(fā)現(xiàn)其中金葡菌產(chǎn)酶菌6株，表葡菌產(chǎn)酶菌1株，大腸埃希菌產(chǎn)酶菌11株，肺炎克雷伯菌產(chǎn)酶菌8株，陰溝腸桿菌產(chǎn)酶菌3株，不動(dòng)桿菌產(chǎn)酶菌3株。質(zhì)控菌為金葡菌ATCC25213，大腸埃希菌ATCC25922。
1.2 試劑
β-內(nèi)酰胺酶紙片為Bio-Merieux公司產(chǎn)品，批號(hào)805223001；Mueller-Hinton(MH)肉湯由北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20060928；Mueller-Hinton(MH)瓊脂培養(yǎng)基也是北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20060506。1.3 抗菌藥物
頭孢呋辛鈉(cefuroxime，CXM)，批號(hào)FN061026A，含量96.0%，深圳立健藥業(yè)有限公司提供；頭孢克洛(cefaclor，CCL)，批號(hào)050801，含量96.4%，廣州BaiYunShan制藥股份有限公司提供；頭孢噻肟鈉(cefotaxime，CTX)，批號(hào)A20070118，含量98.08%，哈藥集團(tuán)制藥總廠提供；阿莫西林(amoxacillin，AMPC)，批號(hào)130409200208，含量86.2%，中國(guó)藥品生物制品檢定所。
1.4 儀器
多點(diǎn)接種儀由日本佐久間制作株式會(huì)社生產(chǎn)，比濁儀為Bio-Merieux公司產(chǎn)品。
1.5 MIC測(cè)定采用瓊脂平板稀釋法［1］
將4種抗菌藥物儲(chǔ)備液倍比稀釋成12個(gè)濃度，分別精密量取1ml不同濃度的抗生素與14ml MH瓊脂培養(yǎng)基在9cm平皿中混勻，zui終稀釋濃度為128，64，32，……0.0313mg/L。將受試菌配制成1.5×105CFU/ml菌懸液，以多點(diǎn)接種儀將受試菌接種于含藥平皿上，同時(shí)設(shè)不含藥平皿對(duì)照，35℃培養(yǎng)18h。以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素zui低濃度為MIC，同時(shí)計(jì)算MIC50、MIC90及敏感率。
1.5 判定標(biāo)準(zhǔn)
標(biāo)準(zhǔn)菌和受試菌藥敏結(jié)果按2006年CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷［2］(表1)。
1.6 統(tǒng)計(jì)方法
應(yīng)用χ2檢驗(yàn)比較各藥物對(duì)細(xì)菌的敏感率。
2 結(jié)果
2.1 4種抗菌藥物對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的體外抗菌活性
結(jié)果顯示(表2)，CXM對(duì)金葡菌的MIC50、MIC90分別為32和>128mg/L，敏感率為45%，敏感率顯著高于CCL，略高于AMPC，與CTX相當(dāng)。AMPC敏感率與CXM相同，較CTX略高，遠(yuǎn)高于CCL。AMPC與CXM對(duì)表葡菌的MIC50、MIC90分別為0.25、4mg/L和0.5、32mg/L，敏感率為88.89%和83.33%。MIC50分別是CCL的/164和1/32，是CTX的1/8和1/4。結(jié)果表明，CXM對(duì)表葡菌體外抗菌活性與CTX、AMPC相當(dāng)，強(qiáng)于CCL(P<0.05)。
2.2 4種抗菌藥物對(duì)革蘭陰性菌的體外抗菌活性
表3結(jié)果顯示CXM對(duì)肺炎克雷伯菌的敏感率較CCL、CTX低，它的MIC50和MIC90分別為32和>128mg/L，敏感率38.1%，敏感率遠(yuǎn)高于AMPC。對(duì)大腸埃希菌，CTX的MIC50和MIC90分別為0.5和128mg/L，敏感率53.85%，在4種抗生素中敏感率zui高；CXM的MIC50和MIC90分別為128和>128mg/L，表1 MIC結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)控范圍表2 4種抗菌藥物對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的體外抗菌活性細(xì) 菌抗菌藥物MIC值(mg/L)MICRMIC50MIC90敏感率敏感率30.77%，敏感率高于AMPC，與CCL相似。不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌對(duì)CTX的敏感率分別為37.5%和50%。CXM對(duì)不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌的敏感率為0，陰溝腸桿菌對(duì)CCL的敏感率也僅為8.33%，提示不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌對(duì)以上4種β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥較重。
3 討論
本研究提示，阿莫西林、頭孢呋辛、頭孢克洛、頭孢噻肟等雖經(jīng)多年臨床廣泛應(yīng)用，各大醫(yī)院大量耐藥菌的不斷出現(xiàn)，CXM和CCL的抗菌特點(diǎn)依然得以保持，即對(duì)臨床隨機(jī)收集的分離常見(jiàn)致病菌如金葡菌、表葡菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌有一定抗菌活性，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的抗菌活性強(qiáng)于第三代頭孢菌素CTX；CXM與AMPC相似，明顯強(qiáng)于同代的CCL，CXM和CCL對(duì)革蘭陰性菌的抗菌活性比第三代頭孢菌素CTX弱，強(qiáng)于青霉素類(lèi)的AMPC。
本研究中，金葡菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對(duì)所測(cè)定的抗生素敏感率均較低，一方面可能與本試驗(yàn)隨機(jī)收集的菌株有關(guān)，因?yàn)?01總醫(yī)院和空總醫(yī)院均為*醫(yī)院，收治的患者病情復(fù)雜，臨床分離菌往往為耐藥菌。不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌是院內(nèi)感染的重要致病原，對(duì)抗菌藥物具有多重耐藥性，其耐藥機(jī)制除產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶外，外排系統(tǒng)及膜孔蛋白缺失也較為常見(jiàn)。另一方面，第二、第三代頭孢菌素在臨床的廣泛應(yīng)用也是導(dǎo)致其敏感率下降的主要因素。
【參考文獻(xiàn)】
［1］ Balows A, Hasler W J, Herrman K L, et al. Manal of clinical microbiology, 6th ed, Washinghton DC: American Society for Microbiology ［ ］. 1995:209=［2］ CLSI,2006.