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大鼠前降鈣素試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號試劑盒

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-09 10:08:30瀏覽次數(shù):513次

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我司大鼠前降鈣素試劑盒細(xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁,還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。

大鼠前降鈣素試劑盒

我司大鼠前降鈣素試劑盒細(xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁,還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。 

選購方法

細(xì)胞株

  Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?

  要冷藏??!因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

  Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。

  幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,-24?C保存。

1、原理:
(1)計算細(xì)胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù)。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,每個chamber中細(xì)刻9個1mm2大正方形,其中4個角落之正方形再細(xì)刻16個小格,深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目,乘以稀釋倍數(shù),再乘以104,即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會滲入死細(xì)胞中而呈色,而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整,染料無法滲入而不會呈色。一般使用藍(lán)色之trypan blue染料,如果細(xì)胞不易吸收trypan blue,則用紅色之Erythrosin bluish。計算細(xì)胞活率:活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×100%。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成,隨時間延長,部分活細(xì)胞也開始攝取染料;因?yàn)榕_盼蘭對蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的親和力,用不含血清的稀釋液,可以使染色計數(shù)更為準(zhǔn)確。

  Q4.細(xì)胞特性
在細(xì)胞培養(yǎng)之前,我們要了解一下你所要養(yǎng)細(xì)胞的基本特性,這點(diǎn)可以從細(xì)胞的產(chǎn)品說明書或者從ATCC細(xì)胞庫查詢。除此之外我們還要知道每管細(xì)胞的數(shù)量,建議分裂或傳代的比例,和已知細(xì)胞的傳代代次等信息。

  Q5.準(zhǔn)備培養(yǎng)基
復(fù)蘇細(xì)胞時需要準(zhǔn)備合適的培養(yǎng)基,血清和細(xì)胞生長所需的添加劑。大部分培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)體系,可以在訂購細(xì)胞系時獲得。
雖然大多數(shù)細(xì)胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長,但是當(dāng)培養(yǎng)基改變時,細(xì)胞的性質(zhì)也會變化。因此,使用細(xì)胞庫推薦的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞會獲得的效果。

  Q6.開啟凍存管
1.準(zhǔn)備一個培養(yǎng)瓶,加入適宜細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,液體體積按照說明書的推薦配置,并平衡培養(yǎng)基的溫度和pH(CO2)?!?br />2.在37℃水浴中或細(xì)胞的正常生長溫度下將凍存管輕輕搖動。解凍要快,約2分鐘或直到冰晶融化即可。
3.從水浴中取出凍存管并用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來消毒。進(jìn)一步的操作均需在無菌操作臺中嚴(yán)格無菌條件下進(jìn)行。
4.擰開凍存管的管帽并將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到一個含有9 ml推薦培養(yǎng)基的無菌離心管中。通過溫和離心(125×g 10 min)除去冷凍保護(hù)劑(DMSO)。棄去上清,并用1或2 ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。將這些細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中并輕輕搖動以*混勻。
5.培養(yǎng)24小時后檢查細(xì)胞狀態(tài)并在需要時進(jìn)行傳代。

  Q7. 培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響

  由于,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

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