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動物組織切片實驗

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所  在  地上海市

更新時間:2022-12-23 10:24:11瀏覽次數(shù):1560次

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應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
動物組織切片實驗是達為科生物的基礎服務項目之一,由病理平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。

2.1樣本包埋與固定
2.1.1取材和固定

切取組織時應使用鋒利的刀、剪,切取組織塊時,從刀的根部開始向后拉動切開組織。組織塊的厚度約為0.2~0.3cm,大小為1.5cm×1.5cm x 0.3cm為宜。取好的組織塊置于10%福爾馬林中固定48小時;

2.1.2洗滌與脫水

將固定后的組織用流水沖洗,去除殘留的固定液和雜質(zhì)。不同濃度的乙醇逐級脫水,50%、70%、85%、95%直至純酒精(無水乙醇),每級2小時。脫水必須在有蓋的瓶中進行,以防止高濃度乙醇吸收空氣中水分導致濃度降低而使脫水不*。需要保存的材料可脫水至70%乙醇時停留其中,如需長期保存,可加入等量的甘油。

2.1.3透明

將組織塊置入純乙醇和二甲苯的等體積混合液中2小時,再進入純二甲苯兩小時,再一次純二甲苯兩小時;材料經(jīng)過透明,會顯示出前一步脫水的效果如何,若脫水*,組織則顯現(xiàn)透明狀態(tài),如組織中有白色云霧狀,說明脫水不凈,須返工處理,但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明時,應避免其揮發(fā)和吸收空氣中的水分,并保持其無水狀態(tài)。

2.1.4浸蠟

浸蠟須在恒溫箱中進行。先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1~2小時,再先后移入2個熔化的石蠟液中浸漬各3小時左右;

2.1.5包埋

包埋是使浸透蠟的組織塊包裹在石蠟中。具體做法是;先準備好紙盒,將熔蠟倒入盒內(nèi),迅速用預溫的鑷子夾取組織塊平放在紙盒底部,切面朝下,再輕輕提起紙盒,平放在冷水中,待表面石蠟凝固后立即將紙盒按入水中,使其迅速冷卻凝固,30min后取出。

2.1.6切片

切片前將蠟塊在-20度冰箱中至少放置30min,以增加硬度。將切片刀裝在刀片機的刀架上并固定緊,固定蠟塊底座或蠟塊,調(diào)整蠟塊與刀至合適位置,刀刃與蠟塊表面呈5度角。調(diào)整切片機上的切片厚度為4-7μm,然后切片。

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