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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2022-12-23 13:58:08瀏覽次數(shù):1366次

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轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是達(dá)為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,由細(xì)胞平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

轉(zhuǎn)染(transfection)指真核細(xì)胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標(biāo)志的過(guò)程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類(lèi),一類(lèi)是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,一類(lèi)是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天。后者也稱(chēng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,外源DNA既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小,大約1/104轉(zhuǎn)染細(xì)胞能整合,通常需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記,如來(lái)氨丙基轉(zhuǎn)移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反復(fù)篩選,得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。

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