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OCT包埋實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2024-11-05 08:58:53瀏覽次數(shù):766次

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OCT包埋實(shí)驗(yàn)

OCT(Optimal Cutting Temperature Compound)包埋實(shí)驗(yàn)是一種用于制備組織冰凍切片的常用技術(shù),特別是在免疫組化和其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。

OCT包埋實(shí)驗(yàn)

OCT(Optimal Cutting Temperature Compound)包埋實(shí)驗(yàn)是一種用于制備組織冰凍切片的常用技術(shù),特別是在免疫組化和其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。以下是基于新信息的OCT包埋實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)步驟:

  1.組織處理:首先將組織塊放入含有一定濃度蔗糖的溶液中,以幫助組織脫水和結(jié)晶。

  2.OCT包埋:將處理過(guò)的組織塊轉(zhuǎn)移到OCT包埋劑中,并確保組織塊wan全被OCT包埋劑包圍。有時(shí)可能需要在不同的OCT包埋劑中交替浸泡組織塊,以確保充分浸潤(rùn)。

  3.冷凍成型:將含有組織的OCT包埋劑放入恒冷切片機(jī)的樣品臺(tái)上,在設(shè)定的低溫下(通常為-22℃)進(jìn)行冷凍成型,以形成適合切片的塊狀。

  4.切片:在恒冷切片機(jī)中,使用專(zhuān)用的切片刀按照所需的厚度(通常為10μm)進(jìn)行切片。切片時(shí)應(yīng)保持組織和切片刀的溫度平衡,以獲得平整且無(wú)損傷的切片。

  5.收集切片:將切割好的切片小心地轉(zhuǎn)移到預(yù)處理的載玻片上,并在低溫下存儲(chǔ),以防止組織退化。

  6.后處理:在進(jìn)行后續(xù)的染色或免疫組化實(shí)驗(yàn)之前,可能需要使用冷丙酮等固定劑對(duì)切片進(jìn)行短時(shí)間固定,以保持組織結(jié)構(gòu)的完整性和抗原的活性。

  7.清洗和染色:使用水或適當(dāng)?shù)木彌_液清洗切片,以去除殘留的OCT包埋劑,然后進(jìn)行常規(guī)的染色程序。

以上步驟綜合了新的操作方法和技術(shù)要點(diǎn)。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,并根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件。實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉所使用的設(shè)備和材料的特性,以確保實(shí)驗(yàn)的成功和結(jié)果的準(zhǔn)確性。


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