目前酶免疫分析（EIA）技術(shù)，已被廣泛應(yīng)用于抗原，半抗原或抗體的定量或定性檢測(cè)分析。辣根過(guò)氧化物酶（HRP）及其偶聯(lián)物是酶聯(lián)免疫分析技術(shù)中常用的一種酶，由于3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）在HRP的顯色反應(yīng)體系中，比其它色原具有更高的靈敏度且無(wú)至癌性而被廣泛應(yīng)用。TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA），免疫斑點(diǎn)雜交或者免疫組化以及氯和過(guò)氧化氫的檢測(cè)分析。為了滿足不同的試劑盒產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)以及科研需求，本公司專(zhuān)門(mén)研制了針對(duì)不同類(lèi)型的基于HRP的免疫分析用TMB顯色液。

TMB單組分顯色液特點(diǎn)：    

即用型：無(wú)需混合，方便快捷，減少誤差   

靈敏度高：不低于A.、B液  

 穩(wěn)定性好：2-8℃保存，有效期不低于36個(gè)月；顯色終止后讀數(shù)穩(wěn)定   

背景低：底物溶液在650nm檢測(cè)時(shí)檢測(cè)OD值小于0.04   

質(zhì)量可靠：產(chǎn)品批間差異小   

外觀：本試劑一般情況下為無(wú)色，有時(shí)略顯淺藍(lán)色或淺黃色

TMB單組分顯色液使用方法：     

用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜鳎ㄓ眉儍羲磸?fù)沖洗），倒出適量的單組分TMB顯色液，待達(dá)到室溫后即可使用。

加液：加完HRP結(jié)合物并孵育一定時(shí)間后，用適當(dāng)洗滌液洗板3-5次，每孔加TMB顯色液100ul。 根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)需要，在室溫（15-25℃）或37℃下避光溫育10-30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，直至顯色至預(yù)期深淺。

終止：加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng)，孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

讀數(shù)：終止反應(yīng)后30分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)定吸光值。

注意：如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀，表明TMB底物反應(yīng)過(guò)于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀，可在終止后馬上讀數(shù)；或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。