抗體的保存直接影響到使用效果,所以對于抗體的保存上一直都是要用心的事,現(xiàn)在您不用羨慕別人的抗體保存的那么好,因為您也可以。
1. 收到抗體后請務必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開管蓋進行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)!為了昂貴&珍貴的抗體,請看清是12000rpm
2. 對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20℃ or -80℃ 。對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20℃是*足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會有更多的好處!
分裝可以程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實驗用完為好,zui少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響,復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來!抗體工作液應該當天配制當天用完,在4℃盡量不要超過1天。避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上。
3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。如果抗體很快(1-2周)會使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則是在-20℃ or -80℃。zui關(guān)鍵的一點是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體! 但是,腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來!因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4℃保存會導致抗體的降解!
4. 大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2周的時間,所以是在4℃的條件下來完成的。4℃運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸! 特殊抗體的保存條件; 酶聯(lián)抗體:永遠保存在4℃,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
IgG3的同型對照:永遠保存在4℃,避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體 無論是保存還是運輸,避免反復凍融,反復凍融會導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!
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