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地高辛（DIG）產(chǎn)品選擇指南——選擇合適的標(biāo)記方法
地高辛（DIG）產(chǎn)品選擇指南——選擇合適的標(biāo)記方法
標(biāo)記DNA探針
如果您有足夠量的高純度模板，建議您采用隨機(jī)引物標(biāo)記方法的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I 和II。這兩個(gè)試劑盒包含了標(biāo)記、封閉、雜交和檢測(cè)所需要的所有試劑，是真正意義上的一站式服務(wù)的試劑盒。二者之間的差別在于檢測(cè)方法的不同：Starter Kit I采用了顯色法，使用顯色底物 NBT/BCIP；而Starter Kit II選用化學(xué)發(fā)光法底物CSPD。
如果您用來(lái)合成探針的DNA模板的量比較少或是質(zhì)量不夠高的時(shí)候，建議您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。該試劑盒于制備高靈敏度的雜交探針，例如單拷貝的基因。其另一個(gè)特點(diǎn)就是實(shí)驗(yàn)中無(wú)需定量斑點(diǎn)檢測(cè)過(guò)程，通過(guò)定量凝膠電泳就可以快速確定PCR標(biāo)記探針的效率。
用缺口平移法標(biāo)記的DNA探針，可以控制探針長(zhǎng)度，一般多用于原位雜交。
標(biāo)記RNA探針
在Northern blot中即可以使用DNA探針，也可以使用RNA探針。通常，RNA探針的特異性和靈敏度都會(huì)更高一些；當(dāng)然如果對(duì)靈敏度和特異性沒(méi)有特別嚴(yán)格的要求的話(huà)，DNA探針會(huì)更方便操作。
如果您需要制備RNA探針的話(huà)，推薦您使用Northern Starter Kit。該試劑盒以線(xiàn)性的DNA為模板，通過(guò)SP6, T7或是T3 RNA聚合酶的作用將DIG-11-UTP摻入到轉(zhuǎn)錄的RNA中，借助化學(xué)發(fā)光底物CDP-Star檢測(cè)。另一個(gè)產(chǎn)品DIG RNA Labeling Kit也可用于RNA探針的標(biāo)記。
末端標(biāo)記寡核苷酸Oligonucleotide
如果您的探針模板非常短，量也比較少，您可以選擇末端標(biāo)記法標(biāo)記寡核苷酸探針。
如果您的探針模板非常短，量也比較少，您可以選擇末端標(biāo)記法標(biāo)記寡核苷酸探針。
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