嚴(yán)格遵守這些ELISA要求避免操作技術(shù)影響
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1.吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
2.液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體 充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
3.孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
4.由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,因此要避光保存。
5.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗 滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙 上拍干。
6.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
7.檢測(cè)吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開(kāi),將其預(yù)熱30min以上。
8.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡 量避免接觸皮膚。
9.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾 水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是 0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
10.要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精 密度。
11.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
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