作為生命科學的重要分支,動物科學的基本任務是在認識和掌握動物遺傳變異、生長發(fā)育、免疫學、繁殖消化代謝等生命規(guī)律的基礎上,為人類提供質(zhì)優(yōu)量多的動物產(chǎn)品。而其中的免疫學研究對于貫穿整個動物科學起到了中樞紐帶的作用。
談到免疫學,映入大家腦海中的一定是生物體抵抗各種細菌和病毒的場景,沒錯,大家的直覺很有道理!其實,免疫學是一門研究生物體對抗原物質(zhì)免疫應答性及其方法的重要科學,也是各種生物疾病防治的基礎。小O同學對此也一直甚有興趣,恰巧今天有幸跟免疫實驗室來一場近距離接觸,快來一起看看吧!
趣味源自深奧之免疫實驗室
我們要參觀的是位于我國東南沿海地區(qū)的一所農(nóng)林高校,這是全國建校早的農(nóng)林院校之一,也是福建省重點建設3所高水平大學之一,小O同學將帶領大家在神秘的動物科學學院開啟我們的發(fā)現(xiàn)之旅。
在動物科學的免疫學研究中,酶免疫測定(Enzyme Immunoassay,EIA)是一種對液相內(nèi)微量物質(zhì)至關重要的測定技術,其分為酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)和酶免疫組化技術,前者用于測定可溶性抗原或抗體,后者用于測定組織或細胞表面的抗原。我們要講的故事將圍繞酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)展開。
ELISA是酶免疫測定技術中應用廣的技術,其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法、直接法、間接法等。接下來,實驗室的老師將采用檢測抗體常用的間接法為你展示精彩的ELISA實驗。
首先,抽取雞的新鮮血液,離心后取上清液,并使用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)進行1:100的稀釋,靜置;
接下來,進行包被抗原,即將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原,保持4℃過夜孵育,然后加入5%的脫脂奶粉進行封閉,洗滌三次,除去未結合的抗原及雜質(zhì);
第三步,加入待檢血清(一抗),保持37℃孵育1小時,之后加入PBS在室溫條件下進行5分鐘的洗滌,拋干;
第四步,加入酶標抗體(二抗),保持37℃孵育1小時,之后加入PBS在室溫條件下進行5分鐘的洗滌,拋干;
后,加入底物顯色,保持37℃反應30分鐘,并加入2 mol的硫酸溶液進行終止。然后就可以用ELISA檢測儀測定OD值(光密度),并計算出P/N比值(陽性血清與陰性血清之比)。
實驗的主義者——奧豪斯微孔板搖床
在整個ELISA實驗過程中,有多個過程需要進行搖蕩混勻的操作,首先是樣品和試劑的混勻,包括稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以實驗的持久性和均一性;其次是洗板洗滌的過程,需要將特異結合于固相的抗原或抗體與反應孵育過程中吸附的非特異成份分離開來,以ELISA測定的特異性。洗板對于整個實驗過程也是關鍵的一步,洗液盡量不要溢出孔外,這就對于搖蕩的穩(wěn)定性有很高的要求。
之前該實驗室采用的搖蕩混勻方法效果欠佳,尤其是穩(wěn)定性和可控性不能,經(jīng)常會出現(xiàn)樣品稀釋地不均勻,或在洗滌過程中由于設備振動發(fā)生洗液濺出孔外的現(xiàn)象,從而造成操作臺污染。這對于敏感性和清潔性要求很高的ELISA實驗顯然是不能接受的。
潛移默化源于親密接觸。一切陳舊糟糕的實驗效果自一個身手敏捷的小家伙初次光臨實驗室的那天起戛然而止,可不要小瞧,它不光極大地提高了環(huán)境適應性,更重要的是有效地保障了實驗安全性,帶來的“化學反應”都令實驗室的工作人員們嘆為觀止??吹较旅孢@臺儀器了嗎?沒錯,我們說的就是它——奧豪斯數(shù)顯控制輕負載微孔板搖床!
扁平的機身設計占用空間更少,可輕松放入大多數(shù)通風櫥或培養(yǎng)箱,橡膠吸盤基座提供了更高的耐久性和穩(wěn)定性。同時,反應靈敏的“神經(jīng)中樞”——微處理控制器和功能強大的心臟——三偏心軸平衡驅動的無刷直流電機能夠確保一致均勻的搖蕩動作可靠運行,并對搖蕩過程中任何突發(fā)情況進行靈活有效的應變。尤其是緩慢升速設計能將速度緩慢安全地提升至目標設定值,以免微孔板的樣品濺出;另外,當系統(tǒng)檢測到障礙物或托盤過載時,將發(fā)出聲光信號警報。整款產(chǎn)品的智能性大大提高了實驗的自主權,從而節(jié)約了人工輔助操作的成本。
俗話說,工欲善其事,必先利其器。一臺性能的實驗室設備對順暢的實驗流程可是至關重要。如果您想了解更多搖床系列或奧豪斯其他實驗室設備的產(chǎn)品信息,或正在尋求更專業(yè)細致的選型指導,請速速聯(lián)絡我們,我們專業(yè)的工程師們歡迎隨時來騷擾哦!
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