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基礎(chǔ)掃盲貼:如雷貫耳的 BLAST 到底是 啥?

來源:廣州市超博科技有限公司   2020年03月26日 13:13  

BlastBasic Local Alignment Search Tool),可謂生信領(lǐng)域zui常用的工具,拿到1段序列(測(cè)序

結(jié)果,或設(shè)計(jì)好的引物等等),1般都會(huì)去 blast 1下,查找相似序列。在查找相似序列的基

礎(chǔ)上衍生出了各種作用,比如鑒別基因組,蛋白質(zhì),查找特定靶區(qū),檢驗(yàn)引物特異性等等。

自打 1990 年由 Altschul SF 等人開發(fā)出來,NCBI 引進(jìn),至今還在改善,更新算法。

量身選用數(shù)據(jù)庫(kù)

BLAST 不僅要考慮選擇哪種算法,還要考慮選哪個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)來比對(duì)。我們zui常用的可能就人

1222類或小鼠基因組+轉(zhuǎn)錄組,但仍可根據(jù)自身情況選擇合適的數(shù)據(jù)庫(kù),能大大節(jié)省檢索時(shí)間,

并提高返回的結(jié)果的質(zhì)量和特異性。

不過這么多庫(kù)怎么選呢,可以點(diǎn)1下旁邊的問號(hào)(Help),查看選所的數(shù)據(jù)庫(kù)的說明:

再者,如果你已經(jīng)知道你要查的序列來自哪個(gè)物種,或你要跟哪個(gè)物種比對(duì),也可以在

Organism 選項(xiàng)框中輸入,也可以減少 BLAST 的操作程序,節(jié)省時(shí)間。

不同的序列要用不同的算法

1223BLAST 工具跟1套手術(shù)器械似的,不同的算法干不同的活,得根據(jù)自己需要的信息,選擇需

要的工具。可以看到檢索頁(yè)面上方有 5 個(gè)選項(xiàng)卡,分別代表 5 種查詢類型。

各大類之下可能還有幾個(gè)小分類可選:

它們的功能要點(diǎn)總結(jié)如下:

1224結(jié)果解讀

找1小段蛋白序列來試1下那個(gè)新算法 Quickblastp??赡苁俏业男蛄刑塘?,并沒有感覺到

Quick (0.0) 如果你的序列夠長(zhǎng)可以體會(huì)1下。

首先會(huì)看到1個(gè)表頭,展示這次比對(duì)的基本信息,如比對(duì)類型、序列長(zhǎng)度、所選的數(shù)據(jù)庫(kù)等

等,就不貼圖了。

接下來就是圖形描述(Graphic Summary)。

1225第1部分是保守域,當(dāng)檢測(cè)到時(shí)才會(huì)顯示。

第二部分是比對(duì)上的序列(hit)在查詢序列上的分布。有刻度的條帶是序列的坐標(biāo),其下的

每1個(gè)細(xì)條帶代表1段 hit,其顏色是按上方的顏色標(biāo)尺顯示比例得分(alignment score),

得分越高,相似度越高。另外還可注意 E value,E 值越低,相似度越高,點(diǎn)擊可顯示詳細(xì)信

息。

保守域也可點(diǎn)開查看詳情,在每個(gè) hit 上懸浮鼠標(biāo)可看到它編碼的蛋白的 3D 結(jié)構(gòu)圖以及功

能等詳細(xì)說明,在下方的列表中點(diǎn)開+號(hào)還可看到具體的序列。

1226這樣便可對(duì)你的序列特征和功能有個(gè)大致的了解

 

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