細(xì)胞自噬（Autophagy）對(duì)細(xì)胞正常行使功能至關(guān)重要，涉及細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、發(fā)育、細(xì)胞死亡、應(yīng)對(duì)侵入等，各種自噬相關(guān)研究也一直備受關(guān)注。       自噬早提出于20世紀(jì)60年代，在2016年，諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了在自噬性溶酶體研究作出貢獻(xiàn)的日本分子細(xì)胞生物學(xué)家大隅良典（Yoshinori Ohsumi）。在疫情來(lái)襲，科學(xué)家爭(zhēng)相探尋有效治療藥物時(shí)，也有研究者關(guān)注細(xì)胞自噬和病毒感染的關(guān)聯(lián)。

     超博推薦-賽默飛品牌-可提供一系列關(guān)于細(xì)胞自噬及其機(jī)制研究的工具，包括Invitrogen™ Molecular Probes™ 的p62及LC3B特異標(biāo)記染料用以研究自噬活性，使研究人員對(duì)細(xì)胞自噬與泛素降解機(jī)制之間的聯(lián)系進(jìn)行深入研究，用于追蹤溶酶體并入自噬體的過(guò)程，還可以檢測(cè)蛋白質(zhì)從合成到通過(guò)自噬途徑聚集和泛素化的全過(guò)程等。

使用LC3B追蹤自噬過(guò)程

LC3B可從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中獲得，并與早期自噬過(guò)程中的吞噬泡形成有關(guān)。這種定位信息可作為自噬膜的常用標(biāo)記，還可監(jiān)控其發(fā)展變化的過(guò)程，實(shí)現(xiàn)：

? 活細(xì)胞及固定細(xì)胞中的自噬追蹤及定位

? 對(duì)含LC3B的囊泡進(jìn)行實(shí)時(shí)pH監(jiān)控

? 定量分析LC3B的聚積

Premo Autophagy Sensor LC3B-RFP (紅)標(biāo)記U2OS細(xì)胞

使用p62追蹤選擇性自噬過(guò)程

p62可作為將要被自噬作用降解的小泡的受體，也可作為要被清除的泛素化蛋白聚集物的受體。p62蛋白可結(jié)合泛素，也可與LC3結(jié)合，從而靶向自噬體并促進(jìn)泛素化蛋白的清除，可以進(jìn)行：

? 活細(xì)胞中的p62追蹤

? 與細(xì)胞標(biāo)記同時(shí)使用進(jìn)行多色分析

 A549細(xì)胞中 p62陽(yáng)性小泡沿微管分布圖像

溶酶體定位和追蹤

溶酶體與隔離細(xì)胞膜融合從而形成自噬性溶酶體，可作為在降解前追蹤自噬性溶酶體融合的有效工具，而具有細(xì)胞滲透性的LysoTracker染料僅需毫微摩爾級(jí)濃度即可標(biāo)記并在溶酶體內(nèi)部定位酸性細(xì)胞器。

? 對(duì)酸性細(xì)胞器具有高度選擇性

? 多種熒光顏色可供選擇

? 可與其他熒光染料或蛋白同時(shí)使用進(jìn)行多色分析

 使用LysoTracker Deep Red共定位HeLa細(xì)胞

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