巨噬細(xì)胞是先天免疫系統(tǒng)的一種特殊的、長壽命的吞噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞是三種吞噬細(xì)胞類型之一，還有粒細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞）和樹突狀細(xì)胞（DCs）。 

       大多數(shù)病原體通過呼吸道、腸粘膜、皮膚病變或泌尿生殖道進(jìn)入宿，NOI個(gè)遇到的就是在粘膜下組織中的巨噬細(xì)胞，它們通常是NOI個(gè)遇到病原體的防御細(xì)胞。一旦微生物進(jìn)入宿主并開始復(fù)制，它就被其中一種吞噬細(xì)胞所識別，并被吞噬形成吞噬溶酶體，然后再經(jīng)過酸化和酶處理，產(chǎn)生高活性一氧化氮和超氧自由基來殺死病原體，這一過程稱為吞噬作用。

     一般來說，巨噬細(xì)胞可根據(jù)其功能和活化程度分為兩個(gè)亞型：經(jīng)典激活的M1巨噬細(xì)胞和交替激活的M2巨噬細(xì)胞。

M1巨噬細(xì)胞主要通過先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)在Th1細(xì)胞募集、病原體抵抗和腫瘤控制中發(fā)揮作用，在免疫失調(diào)疾病例如系統(tǒng)性紅斑性狼瘡，多發(fā)性硬化癥，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等會有高量的M1巨噬細(xì)胞存在。

 交替激活的M2巨噬細(xì)胞在病原體寄生蟲清除、抗炎反應(yīng)和代謝、傷口愈合、組織重塑、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤進(jìn)展和惡性腫瘤中發(fā)揮作用，與M2細(xì)胞典型相關(guān)疾病就是過敏和哮喘。

       作為免疫系統(tǒng)的一部分，巨噬細(xì)胞在對抗疾病方面的調(diào)節(jié)作用外，巨噬細(xì)胞在慢性炎癥、自身免疫性疾病和癌癥中也扮演著消極的角色。在正常的免疫反應(yīng)中，促炎性巨噬細(xì)胞受到調(diào)節(jié)，使得它們的促炎信號在數(shù)量和時(shí)間上受到限制。在長時(shí)間的免疫損傷過程中，巨噬細(xì)胞不斷地分泌調(diào)節(jié)失調(diào)的細(xì)胞因子。這些過程持續(xù)慢性炎癥，被認(rèn)為在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。

     一般研究巨噬細(xì)胞使用的就是流式細(xì)胞儀或是先用磁珠細(xì)胞分選產(chǎn)品((Dynabeads FlowComp Human CD14 Kit貨號11367D)從PBMC懸浮液中分離出CD14+單核細(xì)胞。分離的巨噬細(xì)胞可以進(jìn)一步培養(yǎng)和刺激，M1和M2極化的巨噬細(xì)胞可以通過用不同的細(xì)胞因子依次刺激單核細(xì)胞而獲得。用RPMI 1640培養(yǎng)基和10%FCS收獲的細(xì)胞可隨后用10ng/mL脂多糖（Invitrogen eBioscience lipopolysaccharide貨號00-4976-03）和50 ng/mL IFN-γ（Gibco-IFN-γ重組人蛋白，貨號PHC4031）獲得M1巨噬細(xì)胞或用20 ng/mL的IL-4（Gibco-IL4重組人蛋白，貨號PHC0041）。獲取M2/M2a巨噬細(xì)胞。用免疫復(fù)合物和IL-1b或LPS治療會導(dǎo)致M2b活化，而添加IL-10、TGF-b或糖皮質(zhì)激素會導(dǎo)致M2c活化。巨噬細(xì)胞類型可通過流式細(xì)胞術(shù)在其表面的某些標(biāo)記物的表達(dá)來識別及進(jìn)行功能研究，如下圖和表內(nèi)所示。

          接著巨噬細(xì)胞的細(xì)胞裂解物或細(xì)胞培養(yǎng)上清液可用于qPCR分析、western blotting或各種免疫分析如ELISA ，Invitrogen ProcartaPlex 多因子，Invitrogen ProQuantum高靈敏試劑盒分析各種細(xì)胞因子的變化。巨噬細(xì)胞功能也會通過吞噬試驗(yàn)來研究，下表推薦了常用的吞噬實(shí)驗(yàn)用試劑。

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