分光光度法是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的試驗(yàn)方法。分光光度計(jì)是基于分光光度法，通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。

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紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的類(lèi)型很多，根據(jù)儀器結(jié)構(gòu)可分為單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)三種，其中單光束分光光度計(jì)和雙光束分光光度計(jì)屬于單波長(zhǎng)分光光度計(jì)。

1.單光束分光光度計(jì) 從光源發(fā)出的光經(jīng)單色器分光后得到一束單色光，通過(guò)吸收池后，最后照射在檢測(cè)器上始終為一束光，如下圖所示。該類(lèi)型的分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜，但由于其雜散光、光源波動(dòng)等影響很大，所以準(zhǔn)確度較差。

2.雙光束分光光度計(jì) 從光源發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)單色器分光后的單色光被反射鏡（切光器）分為強(qiáng)度相等的兩束光，分別通過(guò)參比溶液和樣品溶液，如下圖所示。由于兩束光同時(shí)通過(guò)參比溶液和樣品溶液，因此能夠自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。雙光束分光光度計(jì)一般能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線，其靈敏度較好，但結(jié)構(gòu)較復(fù)雜、價(jià)格較貴。

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3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì) 由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過(guò)兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長(zhǎng)的單色光，再利用切光器使兩束不同波長(zhǎng)的單色光以一定頻率交替照射同一溶液，然后再經(jīng)過(guò)光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，經(jīng)過(guò)信息處理最后得到兩波長(zhǎng)處的吸光度的差值，如圖3-11所示。雙波長(zhǎng)分光光度法一定程度地消除了背景干擾及共存組分的干擾，提高了分析的靈敏度。雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)不僅可用于多組分混合試樣的分析，還可以用于一般分光光度計(jì)不能測(cè)定的渾濁試樣（如生物組織液）的分析。

紫外分光光度計(jì)選型時(shí)，首先確定實(shí)驗(yàn)是定性分析還是定量分析，同時(shí)被測(cè)樣品的狀態(tài)（液體、氣體、固體）也應(yīng)在考慮范圍內(nèi)。當(dāng)然，最主要的決定因素是不同型號(hào)之間的價(jià)格差異，在預(yù)算充足的情況下，選擇靈敏度好的分光光度計(jì)，一定會(huì)給實(shí)驗(yàn)分析帶來(lái)事半功倍的效果。蘇州思普萊代理的日立分光光度計(jì)，整機(jī)日本進(jìn)口，配置多種類(lèi)測(cè)量附件，是科研院校的分光光度計(jì)品牌。