欧美……一区二区三区,欧美日韩亚洲另类视频,亚洲国产欧美日韩中字,日本一区二区三区dvd视频在线

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>解決方案>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

如何擺脫qpcr苦惱,得到更好的結(jié)果

來源:北京和一生物科技有限公司   2022年03月03日 17:30  

什么是熒光定量PCR?

指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個
PCR進(jìn)程,使每一個循環(huán)變得“可見”,最后通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對樣品中的DNA(or cDNA)的起始濃度進(jìn)行定量的方法。

定量PCR原理?

與傳統(tǒng)PCR一樣,反應(yīng)在溫度模塊里循環(huán)進(jìn)行;理論上每經(jīng)過一個循環(huán)目的基因的數(shù)量都會增加一倍;每個循環(huán)結(jié)束后,定量PCR儀器通過不同的濾光片記錄熒光信號;在擴增過程中,熒光信號隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強。

 

定量PCR體系?

普通的PCR體系;模板,引物,dNTPs,buffer,Taq酶;加入各種類型的熒光染料。

在做Real time PCR時,對于SYBR Green I染料法和Taqman探針法都可以,但是二者有區(qū)別。SYBR Green I染料法是利用SYBR Green I結(jié)合雙鏈DNA來檢測PCR產(chǎn)物,可用于監(jiān)測任意雙鏈DNA序列的擴增,但是必須考慮非特異性擴增。因成本相對低,是目前較常用的)。但是由于SYBRGreen I可以與所有的雙鏈DNA結(jié)合,包括非特異性的雙鏈DNA序列,因此可能會產(chǎn)生假陽性信號。

1.png

圖1:SYBR染料法原理圖


Taqman探針法使用熒光探針檢測PCR擴增過程中產(chǎn)生的特異PCR產(chǎn)物:特異性熒光信號的產(chǎn)生,需要探針與目標(biāo)序列進(jìn)行特異性的雜交;探針可以標(biāo)記不同的報告基團,因此可以在一個反應(yīng)管中進(jìn)行二條序列擴增完整的探針。5′端熒光基團吸收能量后將能量轉(zhuǎn)移給臨近的3′端熒光淬滅基團(發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移);退火,探針與模板結(jié)合,引物在聚合酶作用下進(jìn)行延伸反應(yīng),遇到探針時發(fā)揮3-5′外切酶活性將探針切碎到反應(yīng)體系中;報告基團與淬滅基團距離變大,在激發(fā)光的作用下發(fā)熒光。實驗結(jié)果重復(fù)性好,價格高。


圖2:TaqMan探針法原理圖


說了這么多,不知道小伙伴們對qPCR的理解是不是清晰多了呢?qPCR作為一種簡單便捷的定量技術(shù),應(yīng)該是小伙伴們常用的技術(shù)了。雖然聽起來簡單但做起來卻沒有想象的那么簡單,事實上,實驗室做一個樣本檢測QPCR需要1~2個小時,這個時候不僅試劑盒重要,檢測能力也很重要,希望這篇文章能幫助小伙伴們對QPCR有一個清晰的了解



免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 91大神国内精品免费网站-亚洲免费电影一区二区| 欧美日韩精品人妻在线-在线播放中文字幕一区| 久久久精品欧美日韩国产-欧美精品乱码视频在线| 亚洲美女喘息呻吟的网站-国产免费一区二区三区三洲| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 黄色91av免费在线观看-欧美黄片一级在线观看| 两性污污视频网站在线观看-亚洲欧美日韩激情一区| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| 少妇人妻无码久久久久久-综合图片亚洲网友自拍| 狠狠狠狠爱精品一二三四区-l舌熟女av国产精品| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 国产人妻人伦精品日本-国产98超碰人人做人人爱| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 亚洲另类熟女国产精品-懂色一区二区三区在线播放| 欧美看片一区二区三区-人妻无卡精品视频在线| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| av网址在线直接观看-黄色av全部在线观看| 黄色91av免费在线观看-欧美黄片一级在线观看| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 性色国产成人久久久精品二区三区-偷窥中国美女洗澡视频| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 国模自慰一区二区三区-日韩一级黄色片天天看| 久色高清精品在线国产-国产精品视频一区三区四区| 97一区二区三区在线-欧美护士性极品hd4k| 亚洲最新国产无人区123-黄片一区二区在线观看| 亚洲黑人欧美一区二区三区-亚洲一区二区三区免费视频播放| 亚洲欧洲成视频免费观看-国产福利一区二区在线观看| 国产剧情av中文字幕-五月婷婷在线手机视频| 亚洲av高清一区三区三区-久久人妻夜夜做天天爽| 国产黄片在现免费观看-色老板最新在线播放一区二区三区| av噜噜国产在线观看-欧美视频亚洲视频一区二区三区| 欧美日韩国产综合四区-爆操极品尤物熟妇14p| sobo欧美在线视频-免费av网址一区二区| 国产精品一区二区在线免费-久久精品国产亚洲av热明星| 久久蜜桃精品一区二区-麻豆视频啊啊啊好舒服| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 丝袜高跟熟女视频国产-熟女少妇亚洲一区二区| 中文字幕亚洲综合久久最新-久久精品视频免费久久久| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂|