更高效的前處理技術(shù)以實現(xiàn)目標(biāo)物的富集和基質(zhì)/雜質(zhì)的清除；
更*的分離手段，得到更純、更集中流出的色譜峰以提高目標(biāo)物的瞬間濃度；
更的檢測技術(shù)以提高目標(biāo)物信號響應(yīng)。

　　目前質(zhì)譜儀因其通用性高、選擇性好和靈敏度高，是主流的檢測技術(shù)，其中，靈敏度是評價質(zhì)譜等級的重要指標(biāo)之一。質(zhì)譜儀的靈敏度受多方面影響，其中可以通過降低進(jìn)入離子源的液流，有效提高離子化效率，從而較大提高質(zhì)譜檢測靈敏度。如目前比較常見的Nano液相、Micro液相和Semi-micro常規(guī)分析型液相，我們來做一下性能對比。

三種液相系統(tǒng)的性能對比

　　Nano液相的液量有利于LCMSMS離子源的去溶劑化，從而提高質(zhì)譜響應(yīng)。但是由于液流過低，其通量較小；另外，納升級的流速對輸液泵的精度和脈沖控制要求非常高，再加上其精密的部件對使用和維護(hù)都有很高的要求。故現(xiàn)有技術(shù)下Nano液相的通量和穩(wěn)定性無法達(dá)到常規(guī)分析型液相的水平。而Semi-micro常規(guī)型液相已成為相對成熟、應(yīng)用范圍相對廣的分析手段，這兩項指標(biāo)非常優(yōu)異，但是，由于較大的液流，導(dǎo)致進(jìn)入離子源，尤其是ESI離子源之后，其去溶劑化效率較差，靈敏度無法進(jìn)一步提高。 Micro液相的色譜柱內(nèi)徑介于0.1~1.0 mm之間，流速一般介于1~100 μL之間，流速下的儀器穩(wěn)定性、耐用性和維護(hù)性都比Nano液相有大幅提高，通量接近半微量分析型液相，而其去離子效率相比半微量分析型液相大大提高。因此Micro液相沒有明顯的短板，理論上是三種液相中相對理想的技術(shù)。

島津微流量液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng) Mikros-LC+LCMS-8060

　　在本研究中研究人員報道了尿苷及其衍生物在低溫及高有機(jī)溶劑的條件下容易析出造成信號變動，指出了利用HILIC等親水原理的核苷酸LCMS分析中需要注意的問題。利用島津微流量液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)測試了總tRNA組分中24個核苷標(biāo)樣，確定了各個標(biāo)樣所用的母離子和子離子，以及在HILIC色譜柱中的保留時間。通過多反應(yīng)監(jiān)測及保留時間，可以區(qū)分這些修飾核苷及其同分異構(gòu)體。

核苷標(biāo)樣微流量液質(zhì)系統(tǒng)色譜圖

測定了24個修飾核苷標(biāo)樣的小檢出量，運用微流液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀檢出下限為0.1-1 fmol，而一般用于鑒定修飾核苷所用的半微流液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀的檢出下限為1-10 fmol。
運用上述建立的方法，對細(xì)長聚球藻 PCC 7942中的修飾核苷進(jìn)行定量檢測，僅需含25 ng總tRNA組分的樣品，即可得到清晰的質(zhì)譜結(jié)果，而在傳統(tǒng)的半微流液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀上得到相同結(jié)果，至少需要含100 ng的總tRNA組分的樣品[6, 7]。

細(xì)長聚球藻樣品圖

　　海南大學(xué)林桓副研究員：修飾核苷中尿嘧啶核苷及其衍生物電離困難及各修飾核苷同分異構(gòu)體之間不易區(qū)分的特點一直是質(zhì)譜檢測的難點。同時常規(guī)的半微流液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀檢出限較高，需要的樣品量較大，這也是不易提取的樣品檢測的制約條件之一。該研究依托島津公司強(qiáng)大的質(zhì)譜分析平臺，使用微流液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀分離鑒定總tRNA組分中的修飾核苷，靈敏度較半微流液相色譜——三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀提高了10倍以上。該方法可支持表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)的發(fā)展。