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細胞搖瓶中的懸浮細胞需要消化嗎

來源:洛陽富道細胞工程技術有限公司   2022年03月09日 08:50  

細胞搖瓶是培養(yǎng)懸浮細胞常用的一種細胞培養(yǎng)耗材,不同于貼壁細胞,懸浮細胞不依賴于支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長。在細胞傳代前首先要消化細胞,那么,如何消化懸浮細胞呢?

125ml細胞搖瓶

三角細胞搖瓶125ml

從懸浮細胞的定義上來說,懸浮細胞是不貼壁的,所以它不需要酶的作用就可以使其從細胞搖瓶表面脫離。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下)來處理懸浮細胞,當我們觀察到懸浮細胞已經長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃)的時候,細胞就可以進行傳代操作了。

500ml細胞搖瓶

三角細胞搖瓶500ml

從顯微鏡下觀察,如果沒有細胞碎片、細胞形態(tài)規(guī)則,就可以選擇直接傳代法。將原瓶中的培養(yǎng)基按比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中,然后補加新鮮培養(yǎng)基,然后隔天觀察細胞密度來考慮是否需要補液。如果從顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)較差時,則需要使用離心傳代法,首先,將細胞懸液轉移到離心管內,1000rpm 離心 5 min;然后棄去上層清液,輕輕地將細胞沉淀彈散,使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞;用吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。


PETG血清培養(yǎng)基瓶

由于懸浮細胞自身的特點,所以細胞搖瓶中的細胞進行傳代前不需要消化,根據細胞生長狀態(tài)選擇直接傳代法或離心傳代法進行操作就可以了。


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