在實驗室環(huán)境中分析細胞時,流式細胞儀是一種廣泛使用且全面的單細胞分析方法。本文詳細介紹了流式細胞儀及工作原理和系統(tǒng)組成。
什么是流式細胞儀?
流式細胞技術(shù)是一種用于分析細胞的具有多種應(yīng)用的技術(shù),包括細胞計數(shù)、表型分析、細胞周期評估和生存力檢測等不同應(yīng)用。流式細胞儀中激光產(chǎn)生的光被樣品中的細胞散射,由檢測器測量,然后轉(zhuǎn)換為可以分析和測量的信號。
流式細胞儀如何工作?
開始使用流式細胞儀,第一步是準備要分析的樣品。從細胞培養(yǎng)物,血液或分解的組織中獲得的細胞應(yīng)制成懸浮液。將該細胞懸浮液分成數(shù)個試管進行染色,保留未染色細胞作為對照。通過添加標記有熒光探針的抗體或染色細胞成分的染料對其他細胞樣品染色。分析細胞內(nèi)蛋白質(zhì)時,首先必須將細胞固定,使用福爾馬林緩沖液并進行透化(使用透化劑),以使抗體和染料進入細胞。細胞與抗體或染料孵育后,將細胞在緩沖液中洗滌,然后重懸在基于鹽的緩沖液中進行分析。然后將準備好的樣品引入流式細胞儀。
流式細胞儀組成部分有哪些?
三個主要組成部分:液流系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng)和電子系統(tǒng)。
在流式細胞儀的中心部分-流通池-樣品材料遇到激發(fā)光并散射光,隨后該光被檢測系統(tǒng)讀取和記錄。
流式細胞儀至少還應(yīng)包含一個激光器,一個檢測器和一個流控系統(tǒng),以確保細胞快速流過激光束。多年來,流式細胞儀中的激光器數(shù)量以及檢測器的數(shù)量和質(zhì)量已顯著增加。這些發(fā)展擴大了可以立即檢測到的標記的數(shù)量。
Navios系列為高通量實驗室的先進流式細胞儀應(yīng)用提供了一個解決方案。強大的性能意味著省心的操作,因為在分析重要樣本時,每個細節(jié)都很重要。
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