手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞實驗步驟：
1. 細(xì)胞收集：懸浮細(xì)胞直接收集到10ml的離心管中，每樣本細(xì)胞數(shù)為(1~5)×106，/mL 500~1000r/min離心5min，棄去培養(yǎng)液。
2. 用孵育緩沖液洗滌1次，500~1000r/min離心5min。
3. 用100ul的標(biāo)記溶液重懸細(xì)胞，室溫下避光孵育10~15min。
4. 500~1000r/min離心5min沉淀細(xì)胞孵育緩沖液洗1次。
5. 加入熒光(SA-FLOUS)溶液4℃下孵育20min，避光并不時振動。
6. 流式細(xì)胞儀分析：流式細(xì)胞儀激發(fā)光波長用488nm，用一波長為515nm的通帶濾器檢測FITC熒光，另一波長大于560nm的濾器檢測PI。
7. 結(jié)果判斷：凋亡細(xì)胞對所有用于細(xì)胞活性鑒定的染料如PI有抗染性，壞死細(xì)胞則不能。細(xì)胞膜有損傷的細(xì)胞的DNA可被PI著染產(chǎn)生紅色熒光，而細(xì)胞膜保持完好的細(xì)胞則不會有紅色熒光產(chǎn)生。因此，在細(xì)胞凋亡的早期PI不會著染而沒有紅色熒光信號。正?；罴?xì)胞與此相似。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點圖上，左下象限顯示活細(xì)胞，為(FITC-/PI-)；右上象限是非活細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，為(FITC+/PI+)；而右下象限為凋亡細(xì)胞，顯現(xiàn)(FITC+/PI-)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心