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實(shí)驗(yàn)概要
本文介紹了脂肪測定——索式提取法(經(jīng)典方法)的原理、步驟及注意事項(xiàng)等。
實(shí)驗(yàn)原理
樣品經(jīng)前處理后，放入圓筒濾紙內(nèi)，將濾紙筒置于索式提取管中，利用yimi或石油醚在水浴中加熱回流，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪(粗脂肪)。采用這種方法測出游離態(tài)脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì)，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
索氏提取法適用于脂類含量較高，結(jié)合態(tài)的脂類含量較少，能烘干磨細(xì)，不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測定。此法只能測定游離態(tài)脂肪，而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出，要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出。另外此法是經(jīng)典方法，對大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 濾紙筒的制備
將濾紙剪成長方形8×375px ，卷成圓筒，直徑為150px，將圓筒底部封好，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣。
2. 稱取樣品，將樣品烘干磨細(xì)，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。
3. 索式抽提器的準(zhǔn)備
索氏抽提器由三部分組成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。
4. 抽提
將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入yimi的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恒溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗(yàn)，理論值抽提6-8小時(shí)，實(shí)際值3-4小時(shí)，但也根據(jù)樣品性質(zhì)來決定。
5. 回收yimi
當(dāng)yimi在提取管內(nèi)即將虹吸時(shí)立即取下提取管，將其下口放到y(tǒng)imi回收瓶內(nèi)，使之傾斜，然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6. 計(jì)算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和樣品重(g)W1——瓶子重量(g) W——樣品重量(g)
濾紙筒應(yīng)事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。
注意事項(xiàng)
1. 樣品應(yīng)干燥后研細(xì)，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。
2. 放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管，否則yimi不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。
3. 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi)。
4. 提取時(shí)水浴溫度不能過高，一般使yimi剛開始沸騰即可(約45℃左右)，回流速度以8-12次/時(shí)為宜。
5 所用yimi必需是無水yimi，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機(jī)物抽出，造成誤差。
6. 若用干樣品測定脂肪，可按下式計(jì)算原來樣品脂肪的含量
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