定義“超靈敏”
對(duì)傳統(tǒng)的ELISAz強(qiáng)烈的要求是具有超靈敏檢測(cè)的能力。然而，“超靈敏”一詞經(jīng)常被曲解。其中一個(gè)原因是與聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的檢測(cè)限(LOD)進(jìn)行了比較。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可以擴(kuò)增核酸，從而檢測(cè)出少量的DNA或RNA拷貝數(shù)。例如，實(shí)時(shí)PRC的LOD是各種核酸的幾個(gè)拷貝數(shù)/檢測(cè)。然而，實(shí)時(shí)PCR和蛋白質(zhì)檢測(cè)系統(tǒng)之間的LOD無法進(jìn)行比較，"超靈敏 "一詞用于蛋白質(zhì)定量是不準(zhǔn)確的。
誤解 "超靈敏 "的第二個(gè)原因是源于在其他各種蛋白質(zhì)檢測(cè)方法中對(duì)LOD的比較。如上所述，許多技術(shù)可以用來量化目標(biāo)蛋白，包括ELISA、LC-MS和芯片實(shí)驗(yàn)室方法。而z低的方法可能被認(rèn)為是'超靈敏'的方法，優(yōu)于其他方法，但這是不合適的，因?yàn)閮H僅根據(jù)檢測(cè)限來比較方法，而不考慮對(duì)特殊儀器或特殊房間的需求以及成本，是沒有用的。也就是說，"超靈敏 "這個(gè)詞并不意味著一個(gè)具體的數(shù)值。那么什么是 "超靈敏"？
澳大利亞新南威爾士大學(xué)的J. Justin Gooding最近詳細(xì)討論了這個(gè)問題。化學(xué)家和生物學(xué)家對(duì) "超靈敏"一詞的使用是不同的。為了以跨學(xué)科的方式定義該術(shù)語，他將超靈敏生物分析傳感器定義為 "具有足夠靈敏度和低背景的生物傳感器，可以達(dá)到亞皮摩爾檢測(cè)極限"。他還解釋說，"這是靈敏度的含義在化學(xué)和生物學(xué)之間的折中，承認(rèn)檢測(cè)限的化學(xué)意義與靈敏度之間的聯(lián)系，因?yàn)樗c背景信號(hào)有關(guān)"。10-13摩爾/升或更小的檢出限可以被稱為"超靈敏"檢測(cè)。如果我們使用96孔微孔板進(jìn)行ELISA，一次測(cè)定體積一般等于100μL。因此，10-13摩爾/升相當(dāng)于10-17摩爾/次，這可能很難實(shí)現(xiàn)。