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操作移液器的步驟一共有幾步

來源:上海希言科學(xué)儀器有限公司   2022年12月13日 18:01  
  移液器的作用就是移液,移液的基本操作可以總結(jié)為以下六個(gè)步驟。
  移液八部曲:移液器情況檢查;設(shè)定容量值;裝槍頭;預(yù)洗槍頭;吸液;排液;退槍頭;移液器清理歸位。
  ▼移液槍狀況檢查
  很多資料上都是寫的移液器操作六部曲,但是我們認(rèn)為,使用移液器首先要做的就是移液器的狀況檢查。檢驗(yàn)內(nèi)容可參考:刻度是否在正確位置,如果上次使用完,未調(diào)整到正確位置,就需要提醒,甚至需要重新校驗(yàn);驗(yàn)證移液槍吸取的精度,經(jīng)常使用移液器,都會大概知道液位的位置,要細(xì)心觀察,當(dāng)然可以進(jìn)行精度檢驗(yàn);觀察移液槍是否漏液的情況,對于老舊的移液器就要注意槍頭和移液器結(jié)合不緊密,導(dǎo)致滴液的問題;另外試用一下移液器,感覺移液器吹吸是否正常,比如有出現(xiàn)移液器反彈不夠利索,那就是出問題了;檢查移液器和槍頭接觸位置是否滿足你的要求,特別是在做微生物無菌操作的情況下。
  再次強(qiáng)調(diào)移液器狀況檢查的重要性,拿一個(gè)不準(zhǔn)確的移液器去做實(shí)驗(yàn),帶給你的只能是不準(zhǔn)確的結(jié)果。
  ▼設(shè)定容量值
  選定正確的移液器,在吸頭最大量程的35-100%范圍內(nèi)操作可提高操作準(zhǔn)確性與重復(fù)性。
  在調(diào)節(jié)槍的過程中切忌超過最大或最小量程,以免損害移液槍的精確度。
  ▼放液
  看了一些放液操作的介紹,其實(shí)我們認(rèn)為,放液的核心就有一點(diǎn):保證你吸取的液體全部進(jìn)入你的體系內(nèi),并且每次的操作都是一致的。比如有人說槍頭緊貼器壁放液,這對于小體積進(jìn)入大容器就是非常不可取的。因此放液沒有固定的什么方法,需要自己根據(jù)不同的情況去區(qū)別對待。
  ▼退槍頭
  槍頭不要亂扔, 避免其進(jìn)入下水道。
  ▼清理歸位
  對照前面移液器的狀況檢查,在使用完移液器后,要將移液器調(diào)回最大量程,檢查移液器是否有污染物進(jìn)入,并及時(shí)清理,將移液器放在合適的位置,避免損壞。
  避免“機(jī)械回沖”,當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí),朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程,這樣可避免“機(jī)械回沖”,確保更高準(zhǔn)確性。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時(shí),直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程
  ▼裝槍頭
  正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合,不要過于用力。
  在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時(shí),很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯(cuò)誤的做法,因?yàn)檫@樣會導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。
  ▼預(yù)洗
  用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次。對于微量移液器,該操作有助于內(nèi)壁吸附,并且可以使大量程吸頭內(nèi)部的空氣等于樣品溫度,保證操作的一致性。
  注意高溫或者低溫液體請不要潤洗,溫度對槍頭的內(nèi)部表面積會有影響,影響槍頭的牢固程度和槍頭吸附液體的量,影響精度。
 有機(jī)液體和高揮發(fā)性液體,由于其揮發(fā)會在套筒內(nèi)形成負(fù)壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,因此要增加預(yù)洗的次數(shù)至六次,使得套筒內(nèi)氣體飽和,避免漏液。
  粘稠液體,預(yù)洗要慢,要保證預(yù)洗達(dá)到實(shí)際吸取液體的位置。
  ▼吸液
  吸取液體時(shí)注意以下幾點(diǎn)即可:速度適宜,減少槍頭外壁沾有液體的量,是否有空氣。
  速度不能過快,過快就會吸入空氣,過快你還需要等待(特別是對于粘稠的液體),或?qū)е挛〔粶?zhǔn)確,吸取過快還容易導(dǎo)致液體進(jìn)入移液器內(nèi)部,特別是酸堿性物質(zhì),會損壞移液器。

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