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熒光定量PCR的應(yīng)用

來(lái)源:北京海洋藍(lán)天科技發(fā)展有限公司   2022年12月16日 15:50  
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。  
分子生物學(xué)研究:
1核酸定量分析對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測(cè),比如近期流行的甲型H1N1流感,轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因拷貝數(shù)的檢測(cè),RNAi基因失活率的檢測(cè)等。  
2基因表達(dá)差異分析比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等),特定基因在不同時(shí)相的表達(dá)差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證  
3SNP檢測(cè)檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性對(duì)于研究個(gè)體對(duì)不同疾病的易感性或者個(gè)體對(duì)特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義,因分子信標(biāo)結(jié)構(gòu)的巧妙性,一旦SNP的序列信息是已知的,采用這種技術(shù)進(jìn)行高通量的SNP檢測(cè)將會(huì)變得簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確。  
4甲基化檢測(cè)甲基化同人類(lèi)的許多疾病有關(guān),特別是癌癥,Laird報(bào)道了一種稱(chēng)作Methylight的技術(shù),在擴(kuò)增之前先處理DNA,使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不受影響,用特異性的引物和Taqman探針來(lái)區(qū)分甲基化和非甲基化的DNA,這種方法不僅方便而且靈敏度更高。

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