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克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用

來源:蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司   2023年02月09日 16:09  

    單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。

    1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建立雜交瘤技術(shù),他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原免疫后的純系小鼠B細(xì)胞融合,成為雜交細(xì)胞系,既具有瘤細(xì)胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細(xì)胞的合成和分泌特異性抗體的特點(diǎn)。將這種雜交瘤作單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),可形成單細(xì)胞系,即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養(yǎng)過程中,只要沒有變異,不同時(shí)間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機(jī)能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。

單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)和局限性

1.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)

(1)雜交瘤可以在體外存活并傳代,只要不發(fā)生細(xì)胞株的基因突變,就可以不斷地生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。

(2)可以用相對(duì)不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。

(3)由于可能得到均一性抗體,所以適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法,如IRMA和ELISA等。

(4)由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能,可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。

2.單克隆抗體的局限性

(1)單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍。由于單克隆抗體不能進(jìn)行沉淀和凝集反應(yīng),所以很多檢測(cè)方法不能用單克隆抗體完成。

(2)單克隆抗體的反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體。

(3)制備技術(shù)復(fù)雜,而且費(fèi)時(shí)費(fèi)工,所以單克隆抗體的價(jià)格也較高 。

單克隆抗體的應(yīng)用

1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑

作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用,很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。

2.蛋白質(zhì)的提純

單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固相基質(zhì)(如Speharose 2B、4B、6B等)上,并制備成層析柱。當(dāng)樣品流經(jīng)層析柱時(shí),待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強(qiáng)度或pH,欲分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。

3. 腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)

將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官,直接殺傷靶細(xì)胞,稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外,將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)可進(jìn)行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。單克隆抗體主要為鼠源性抗體,異種動(dòng)物血清可引起人體過敏反應(yīng)。因此,制備人-人單克隆抗體或人源化抗體更為重要,但此方面仍未取得明顯進(jìn)展。
      蘇州阿爾法生物多種單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗、抗體蛋白、熒光染料等生物試劑、抗體試劑應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、免疫蛋白質(zhì)組化、分子生物學(xué)。


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