1.  引言

卡巴他賽( cabazitayel) 是新一代紫杉烷類化合物( 結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖 1) ，通過(guò)干擾細(xì)胞有絲分裂和分裂間期細(xì)胞功能所必需的微管網(wǎng)絡(luò)而起到抗腫瘤作用。臨床前研究顯示，卡巴他賽對(duì)多種多西他賽敏感及不敏感的移植瘤均表現(xiàn)出很高的抗腫瘤活性。

2010 年，卡巴他賽注射液( 商品名 Jevtana) 由美國(guó) FDA 批準(zhǔn)，與潑尼松聯(lián)合用于治療既往已接受過(guò)一種含多西他賽治療方案的轉(zhuǎn)移性激素不應(yīng)性前列腺癌。但吐溫 80 的使用可導(dǎo)致嚴(yán)的過(guò)敏反應(yīng)及外周神經(jīng)毒性、嗜中性粒細(xì)胞減少癥等毒副作用，同時(shí)也會(huì)影響藥物在體內(nèi)的分布，使藥物呈現(xiàn)非線性藥代動(dòng)力學(xué)分布; 乙醇可能會(huì)影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)。脂肪乳劑因具有溶劑特性，能夠提高載藥量，其將藥物包裹在內(nèi)相避免與血管直接接觸，減少藥物降解并降低刺激性，耐受終端滅菌等特點(diǎn)使其成為難溶性藥物的良好載體。

本文作者采用高壓均質(zhì)技術(shù)，制備了高載藥卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液(平均粒徑在200 nm 的脂肪乳劑) ，并通過(guò)粒徑、pH 值、殘氧量、全氧化值和藥物含量等指標(biāo)，研究容器內(nèi)殘氧量對(duì)卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液穩(wěn)定性的影響。

2.  儀器設(shè)備

Nicomp 3000 納米粒度儀

品牌：美國(guó)PSS，Nicomp 3000系列

原理：納米粒度儀采用動(dòng)態(tài)光散射原理(DLS)檢測(cè)分析樣品的粒度分布?；诙嗥绽针娪竟馍⑸湓頇z測(cè)ZETA電位。其主要用于檢測(cè)納米級(jí)別及亞微米級(jí)別的體系，粒徑檢測(cè)范圍0.3nm-10μm，ZETA電位檢測(cè)范圍為+/-500mV。DLS從傳統(tǒng)的光散射理論中分離，關(guān)注光強(qiáng)隨著時(shí)間的波動(dòng)行為。我們通過(guò)光強(qiáng)值的波動(dòng)得到自相關(guān)函數(shù)，從而獲得衰減時(shí)間常量τ，根據(jù)公式換算獲得粒子的擴(kuò)散系數(shù)D，再根據(jù)Stocks-Einstein方程計(jì)算粒徑大小。

檢測(cè)關(guān)鍵點(diǎn)：粘度、折光率、溫度

圖2 原理圖	圖3 儀器外觀

3.  樣品制備及表征

卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液的制備主要分為四個(gè)部分，分別是油相制備、水相制備、初乳制備、均質(zhì)乳化。

① 油相制備：稱取 0. 12 g 卡巴他賽與 1. 2 g 蛋黃卵磷脂E80 溶解于適量無(wú)水乙醇，于 80 ℃ 用磁力攪拌將無(wú)水乙醇揮干至恒重，再加入 0. 05 g 油酸，0. 2 g 膽固醇和 10 g 中鏈甘油三酯，用磁力攪拌于 70 ℃攪拌混合均勻，即得油相。

② 水相制備：稱取 0. 2 g 泊洛沙姆 188 和 2. 25 ～ 2. 50 g 注射用甘油溶解于適量氮?dú)怙柡偷淖⑸溆盟校?5 ℃ 保溫待用，即得水相。

③ 初乳制備：在高速分散機(jī)剪切下，緩慢將水相加入上述油相中，再以 10000 r·min 的轉(zhuǎn)速下攪拌3 min，得到初乳;

④ 均質(zhì)乳化：將初乳冷卻后，用 0. 1 mol·L NaOH溶液調(diào) pH 值至 6. 80 ～ 6. 90，以氮?dú)怙柡偷淖⑸溆盟ㄈ葜?100 mL，轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中，2. 0 × 10 kPa 均質(zhì) 2 次，8. 0 × 10 kPa 均質(zhì)6 次。將終乳經(jīng) 0. 22 μm 微孔濾膜過(guò)濾，分裝入西林瓶，充入氮?dú)夂筌埳w密封。

制備的卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液灌裝 30 mL 置 50 mL 的西林瓶中，在軋蓋密封時(shí)，固定氮?dú)饬鞯膲毫εc速度流量，通過(guò)調(diào)整充氮時(shí)間控制充入氮?dú)饬康亩嗌?，平行操作將樣品分成低氧組( 容器內(nèi)殘氧量低) 及高氧組( 容器內(nèi)殘氧量高) 。

分別避光置于 40、60 和 80 ℃恒溫水浴槽中，分別于 0、1、3、5 和 10 d 時(shí)取樣，用冷水浴迅速降至室溫使反應(yīng)終止，將卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液用純化水稀釋后用 Nicomp 3000 測(cè)定脂質(zhì)微球的平均粒徑與分布。

4.  實(shí)驗(yàn)結(jié)果

大部分氧化磷脂會(huì)導(dǎo)致磷脂分子層的無(wú)序性。氧化后磷脂不飽和脂肪酸側(cè)鏈斷裂，使其親脂性降低而更傾向于水相，非極性側(cè)鏈分子間作用力減小降低了界面膜的強(qiáng)度，引起脂質(zhì)微球的物理不穩(wěn)定性。

但本研究中，制劑在加速試驗(yàn)中平均粒徑和分布并沒(méi)有顯著增大，可能因?yàn)樵谔幏街屑尤肓诉m量膽固醇，在遠(yuǎn)高于磷脂相變溫度( E80 相變溫度約 8 ℃) 的加速條件下，膽固醇改善了氧化磷脂導(dǎo)致的界面膜的無(wú)序性，提高制劑的物理穩(wěn)定性，避免了乳滴的增大。

5.  結(jié)論

對(duì)比試驗(yàn)中，Nicomp 3000 對(duì)脂質(zhì)微球顆粒大小、顆粒分布、Zeta電位進(jìn)行表征，從而篩選配方，節(jié)省研發(fā)時(shí)間。此外還可搭配PSI微射流均質(zhì)機(jī)、AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器、LUM穩(wěn)定性分析儀，為脂質(zhì)體的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供整套解決方案。

7.  結(jié)論

參考資料

[1] 李爽,劉陽(yáng),何海冰,樸洪宇,唐星.卡巴他賽脂質(zhì)微球注射液容器內(nèi)殘氧量對(duì)制劑穩(wěn)定性影響[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2016,33(12):932-937+944